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用96-微孔板分光光度计检测薯蓣皂苷元的含量

ruyuhaha

2015/09/17

紫外可见分光光度计（UV）

1. 实验材料
薯蓣皂苷元标准品母液的配置：精确称取薯蓣皂苷元标准品（纯度98%）5mg，溶于10ml甲醇中，母液浓度为0.5mg/ml（0.5μg/μL），现用现配；
2. 实验方法
标准曲线的建立：分别吸取0、4、8、12、16、20μL 薯蓣皂苷元标准母液于新的96微孔板的每个孔中，每个浓度3个重复，室温条件下挥干溶剂，然后每个孔内添加200μL 70-72%的高氯酸，然后迅速将微孔板放入经预热的微孔板分光光度计内，35℃，摇振2min，静止10min后，在350nm～700nm波长范围内扫描其最大吸收波长，并在最大吸收波长下测定吸光值，根据最大吸收波长及系列标准溶液中的diosgenin的含量，绘制标准曲线。
图1为薯蓣皂苷元在在350nm～700nm波长范围内的光谱扫描图，根据图1所示，可确定其最佳吸收波长为410nm。
图2为根据高氯酸显色分光光度法最终得到的标准曲线，线性回归方程为y=0.1218x+0.0404，r=0.9988。y代表410nm处的吸光值，x代表反应体系中的diosgenin含量（μg）。
图1 薯蓣皂苷元的光谱扫描图

图2 薯蓣皂苷元的标准曲线

3.结果与讨论
样品中薯蓣皂苷元含量的确定：将提取制备的薯蓣皂苷元粗提物用甲醇完全溶解，然后吸取体积的样品溶液至新的96-微孔板的孔内，室温下挥干溶剂，然后按照上述实验条件进行检测，最后根据其在410nm处的吸光值和线性回归方程y=0.1218x+0.0404计算，可得出薯蓣皂苷元的含量。

分
该帖子已被版主-过年杀只猪加10积分，加2经验;加分理由:原创

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tutm

第1楼2015/09/19

使用的仪器是啥样的？

0

qianguiyun1

第2楼2015/09/20

应助达人

微孔板没有见过，能不能普及一下？

0

小虾米

第3楼2015/09/26

实验数据很少啊

0

onlyyousky

第4楼2015/09/30

其实提取比较关键

0

暗夜精灵

第5楼2015/09/30

内容比较短。能多讨论一下吗

0

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