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请问化学发光法的具体步骤方法。（贤集网刊）

zhizaifeiy

2016/02/23

简介：
PIERCE的化学发光技术居于世界领先地位。由于采用了持有专利的Luminol/增强剂技术，因此灵敏度高、发光持续时间长。正是由于性能卓越，许多知名的化学发光试剂盒厂商都是采用PIERCE提供的底物系统作为生产原料。目前，PIERCE的化学发光技术已经广泛用于Western/Northern/Southern印迹、ELISA、EMSA等实验中，使用范围越来越广。SuperSignal® Western化学发光底物系统是PIERCE的旗舰产品。

原理：
在HRP催化作用下，过氧化物与Luminol/增强剂反应发强光，可见光信号可以用压片法检测。Western实验中，HRP标记在二抗上，与一抗－靶蛋白复合物结合，再用SuperSignal®底物进行发光检测。具有方便、灵敏、信号持久的特点。

SuperSignal®系列化学发光底物的性能：

West Pico
化学发光底物 West Dura
持久性化学发光底物 West Femto
最高灵敏度化学发光底物
最低检测极限 10-12克 10-14克 10-15克
建议抗体稀释度一抗：1/1000-1/5000 一抗：1/1000-1/50000 一抗：1/5000-1/100000
二抗：1/20000-1/100000 二抗：1/20000-1/250000 二抗：1/100000-1/500000
信号持续时间 6-8小时 24小时 8小时
工作溶液稳定性室温24小时室温24小时室温8小时
贮藏液存放时间室温1年室温1年室温6个月或4°C一年
推荐印迹膜 NC膜 NC或PVDF膜 NC或PVDF膜

特点/优点：
1.强发光；相同条件下，SuperSignal® West Pico底物产生的光强度是ECL底物的2倍（如图示：SuperSignal® West Pico与ECLTM系统的发光强度的比较）。

uperSignal? West Pico底物，曝光1m
ECLTM系统，曝光1m SuperSignal? West Pico底物，曝光5m
ECLTM系统，曝光1m

2.卓越的灵敏度，抗体稀释倍数高（如图示：SuperSignal® West Pico的检测灵敏度）

用1/5000 的一抗和1/400000的二抗标记IL-2的杂交膜，用SuperSignal® West Pico底物可以检测低至61飞克的IL-2

3.稳定的信号持续，信号持续时间长（如图示：SuperSignal® West Pico与ECLTM系统发光动力学比较）

二抗标记的膜用两种底物系统孵育6h后相对发光强度比较

具体资料可见：
http://www.ebiotrade.com/custom/hyclone/SuperSignal.htm
回复:
参见下面的帖子！建议多在论坛里搜索！
http://www.bbioo.com/bbs/thread/741011
http://www.bbioo.com/bbs/thread/759135
http://www.bbioo.com/bbs/thread/684487
www.xianjichina.com

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