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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF MS）操作规程（sop）

生物质谱

  • 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程


    一. 开机
    1. 开主机总电源至ON（此时分子泵启动）。
    2. 开机诫泵电源至ON，必要时振气30分钟。
    3. 开主机正面有钥匙的开关至ON（顺时针）。
    4. 开计算机及显示器，启动FLEXcontrol软件。
    5. 等待源高真空达到3×10-6mbar，如达不到该数值，检查是否有漏气发生。
    6. 打开高纯氮气（纯度99.999%以上）钢瓶，使激光器内氮气压力为1700mbar左右并保持稳定。
    7. 进入日常操作。

    二. 关机
    1．将靶退出。
    2．在FLEXcontrol界面的Spectrometer关掉高压HV（按“OFF”）。
    3．关闭所使用的软件，关闭计算机。
    4．关主机正面有钥匙的开关至OFF（逆时针）。
    5．关机诫泵电源至OFF。
    6．关主机总电源至0FF。

    三．日常操作
    1． 打开FLEXcontrol进入仪器控制界面。
    2． 确认真空度为10-7mbar或稍低。
    3． 通过界面Carrier▲或主机正面的Load EJECT开关，将样品靶放入仪器，等待约2分钟，调整好靶位。在此过程中不应操作软件或硬件，以确保仪器通讯畅通。
    4． 根据测量目的选择测量方法
    ⑴． 分子量测定：根据分子量大小选择相应的线性测量方法和仪器校正方法。
    疲?nbsp; 肽质量指纹谱测量：根据所需测量的肽谱范围选择相应的反射测量方法和仪器校正方法。
    ⑶． 根据需要选择正离子或负离子测量方法和仪器校正方法。
    ⑷． 酌情选择FAST方法。
    5． 选择适当的仪器参数
    6． 测量
    ⑴． 手动测量
    a． 选择好待测样品的靶位及相应参数后，按 Start开始测量。
    b． 根据图谱的质量按Add添加或按Clear Sum删除图谱。
    c． 按Save As保存图谱。
    注：在测量过程中可随时调整激光能量和靶位置以获得最佳信噪比和分辨率。
    ⑵． 自动测量
    a． 按菜单AutoXecute，再按Select选择一个Sequence文件名。
    b． 按Edit编辑待测样品，用Sample position 的Sample依次选定靶位后按Add添加到Edit AutoXecute Sequence中。
    c． 按AutoXecute Method选择Calibration或样品测量方法。
    d． 按Edit设定激光能量、靶位移动、累加方法等参数并保存该参数。
    e． 按Start Automatic Run开始自动测俊?7．处理图谱
    （1） 打开XTOF进入图谱处理界面。
    （2） open 菜单选择待处理的图谱。
    （3） 标峰：a）反射模式标单同位素峰；b）蛋白质线型测量模式时标平均峰。
    （4） 打印图谱。

    四．注意事项
    1． 关机时氮气可不关，可将压力适当调低，以免仪器受潮。
    2． 手动测量过程中随时注意仪器的漂移，若有漂移需用标肽或标准蛋白校正仪器。
    3． 一定注意氮气的纯度不低于99.999%。
    4． 换氮气钢瓶时应先将激光器的电源关闭，将气管吹干净后方可接入激 光器。
    5． 要得到一张满意的图谱，必须调整合适的激光能量。
    6． 关机时应先关高压后再退出FLEXControl。
    7． 须等待样品靶点完全干燥后才能将靶放入仪器，且不宜过夜。
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    +关注 私聊

  • chx229

    第1楼2008/02/19

    非常感谢楼主，我是新手，有几个问题：
    1.实验室的MALDI-TOF每天都不关，有什么害处。
    2.样品若是在target上过夜或是更长时间，对测试有何影响，若不考虑样品变质的问题。
    谢谢

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  • 专注仪器

    第2楼2008/03/26

    你们这种质谱仪贵吗？在哪里能买到啊？

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  • maldiguy

    第3楼2008/09/01

    1. 害处是不节能
    2. 一般没问题的，如果样品不吸水的话。如果在仪器里面(真空)就更好了

    chx229 发表:非常感谢楼主，我是新手，有几个问题：
    1.实验室的MALDI-TOF每天都不关，有什么害处。
    2.样品若是在target上过夜或是更长时间，对测试有何影响，若不考虑样品变质的问题。
    谢谢

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  • drhuzc

    第4楼2008/09/01

    非常感谢楼主，我是新手

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  • jenny1984

    第5楼2009/12/04

    非常感谢楼主，学习学习

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  • ruanliping

    第6楼2010/03/04

    非常感谢楼主，学习中

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  • hongyestn

    第7楼2011/05/04

    终于找到sop了，虽然不用亲自做，但很想知道如何做

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  • lucia_J

    第8楼2011/05/04

    这也被你挖出来了，不过这个对于很多新手来说可以看看。

    hongyestn(hongyestn) 发表:终于找到sop了，虽然不用亲自做，但很想知道如何做

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  • 金水楼台先得月

    第9楼2011/05/05

    还没有仪器，先学习一下。

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  • hongyestn

    第10楼2011/05/05

    呵呵，好奇嘛，很想看看到底如何操作的

    lucia_J(hgy154) 发表:这也被你挖出来了，不过这个对于很多新手来说可以看看。

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