第四期：中国乳制品相关产品标准、检测标准及质量控制

【仪器微课堂·第4期】中国乳制品相关产品标准、检测标准及质量控制

分享形式：微信群中ppt图片+语音
参与人数：415人
内容整理：版友 @ynmyx

zfxly老师在仪器微课堂群中进行了微信直播，主题为：中国乳制品相关产品标准、检测标准及质量控制，网友们反应热烈，表示受益非浅。为了让更多的版友看到这期讲座，版友 ynmyx 整理了本期讲课内容，内容包括图片与文字，图片为zfxly老师的PPT课件，文字为zfxly老师的口述，分享给大家。大家对讲课内容有什么疑问，可在乳制品检测版块发帖，zfxly老师会去回复。
先来看下微课堂现场：

嘉宾分享环节

口述简要：主要围绕三个问题，第一部分是国家乳制品相关的一个标准的框架体系，会介绍技术标准、产品标准。第二部分围绕前检测标准展开介绍，会涉及到相关的检测项目和相关的举例集中存在的问题。第三部分就质量控制我的个人的一些建议。

口述简要：首先来看我们国家的一些乳制品相关的标准情况，其实我们国家的乳制品的整体标准化体系是非常完善也非常完整的，相对于美国、欧盟的体系的话，我们标准的框架更明朗化，标准更清晰化，非常的齐全的。整理截止到目前我们乳制品相关的产品标准、检测标准含义等，主要的产品标准有十八项，这其中包括了我们常用的原奶、液体奶，乳酸菌，奶酪，奶油相关的，包括了比较头痛的GB10765，GB10767，GB25596，GB29922，其中25596和29922是最新推出来的。我们针对这些产品标准里面涉及到一个检测标准梳理出来。我前前后后梳理了包括六十一项检验标准。
这里边包括了原卫生部公布的六十六项检测标准标准，包括2013年推出的三项的检测标准，另外还包括了基础标准gb5009一系列的汞、无机砷，氟等等。还有一个是我们在2008年推出了三聚氰胺的22388，氨基酸的5009.124，我们对生产企业还有一个生产规范，企业非常头疼的GB12693，GB23790，29923和14881。
那么其中六十一检验标准并不能涵盖我们所的检测项目。其中有一部分像我们现在是没有检测方法的，一会我在后面也会提到。那么我刚才介绍的是产品标准，生产规范和相关的检验标准一个大概的数量情况。那么在标准是之下，基础的还有限量标准，标签标准和营养强化剂的使用标准，这三项标准也是至关重要的。

口述简要：限量标准常用的GB2760、2761、2762、2763，这四个标准的更新速度非常快，尤其是2760，标准中对各类添加剂在不同基质中使用限量和残留量进行了详细规定。我举个例子，香精香料，他的规定和其他的标准会有冲突，那么在第二个咱们今天的话给大家做一个引导。那以后有机会的话咱们再慢慢的沟通和交流。第二个的话就是标签标准，标签标准的话其实也是也是比较重要的，比如GB7718，28050，13432。
标签通则是30643，我举个例子，就是我们在特配就是10705和10707里面，然后规定的我们的实际的每一个项目的检测值要大于标签值的80%，但是呢大家要注意这点和1342和28050之间是有一个不同，就是维生素a和维生素d。在28050里面是规定大于80%小于标签的180%，但在13432上面就没有这个规定。
13432是预包装特殊膳食用的标签，适用于儿童（婴幼儿），28050适用于普通食品的，按道理13432应该比28050更严格，但刚才的这个例子，在维生素a和维生素d的规定上，13432反而不足，可能在以后的修订中进行修订。
再举一个例子就是我们的膳食纤维，大家都知道奶粉中的膳食纤维现在没有明确的检测方法的，那么我们现在用的GB5009.88是不适用于奶粉的，里边有个新的注解规定是这么写的：奶粉的膳食纤维等于膳食纤维加上可溶性的低聚糖之和，这个规定我也没有咨询到标准的起草单位是怎么考虑的，按照我们实验室和日常的经验积累来看，这个规定是有些不是那么的合理的，因为在奶粉中的膳食纤维，如果采用50.88这个方法来检测的话，他对可溶性的低聚糖是不准确定量，如果再加上低聚糖和低聚果糖这种可溶性的结果会偏高的，因为低聚糖和低聚果糖是作为膳食纤维，有可能会作为碳水化合物和能量的计算中，标签的解读里面有一句话是这么写的：膳食纤维包含单体的小分子和分子量比较小的可溶性的低聚糖，这么说的话这两类是需要参与的计算里面的，如果不能准确定量，其实对结果是会有影响的。
第三类就是营养强化剂的使用标准，最熟悉的就是GB14880，对每一种营养强化剂在不同的基质的使用都作了一个限量规定，当然每一个标准都有一个发展的过程和存在一定的不足，对21922，23526这几个基本术语和通则一一解读。

口述简要：相关的乳制品的产品标准共18个，包括了很多不同类别，我对这18个产品标准里面涉及的所有的项目进行了逐一的梳理，整理出来77个检测项目。刚才也提到60多个检测方法，那么这里边肯定就有一些检测项目目前没有国标方法可以使用。
这里面每个项目的话就是现在还没有国标识使用的话，我也很高兴能够把我实验室非标使用的情况给大家一个分享，即使有国标，但是有些项目也是或多或少存在他一定的问题的。
出现这些问题以后我建议大家对这些方法可以做一定偏离，举个例子，叶黄素国标里面是直接使用0.1%BHT丙酮溶液提取，重现性和准确性可能不正常，结果偏低。大家可以更改为，奶粉溶解后，再使用0.1%BHT丙酮溶液提取，结果会正常。

口述简要：下面我对维生素举几个例子：要注意的关键点或者哪些值得注意的地方，或者对方法存在哪些不足的地方，因为奶粉的基质是很复杂的，高蛋白、高脂，部分水解，深度水解等，都对方法提出了一个很大的挑战。
维生素A、E这个也是争议比较大的项目，在国标里维生素A、D、E是一起前处理，提取完以后，维生素A、E直接上机分析，维生素D是经过正相的富集、净化以后，再经过反相的分离、定量。这里边维生素A容易分解的，维生素A是松散的淡黄色粉末，如果发现结块，这时纯度可能已经到了50%左右，所以要给予注意。维生素A要放在-20度的冰箱里边保存，贮备溶液可以分成数个小瓶，每次取一份使用，即使这种，每次使用之前也要通过紫外进行校正。校正方法在国标5413.9里边有相应的方法，每次使用至少每周进行一次校正。

口述简要：加标回收存在空白基质不好找、回收率不能完全反应提取效率的缺点。因此要慎重选择；实验室间比对是非常好的方式，制定方案，选择实验室、使用方法、数据分析等进行分析。
实验室内的质量控制，按年度、季度等进行
质控图是一个内部质量控制比较好的方法，通过一个定值的质控样品，每天进行分析，绘制一个检测结果趋势图可以直观的看出每次样品检测的走势。

问题解答环节

1、问：5413.27脂肪酸。对于以面积归一化的，5413.27有要求乘以换算系数，但是17376-17377-2008测脂肪酸组成的却没有要求，而且一般谱图结果直接就可以归一化，没有乘以换算系数，二者的计算方式在卡限值的结果会有影响，我们应该是根据具体标准具体操作吗？
张老师：17377是以脂肪酸甲酯的形式表示，而5413.27是以脂肪酸的形式表示

2、问：5413.36 反式脂肪酸。张老师，前两天提问了关于标准中对于反式脂肪酸积区域的疑惑，按标准中C18:2 T 是从反亚油酸起点到油酸起点，经常会遇到在这个区域有四个峰，但是按实际情况不应该是C18:2 9T,12T ;C18:2 9C,12T;C18:2 9T,12C 这三种C18:2 T,共轭亚油酸不在这区域出峰，也不算反式脂肪酸吧？
张老师：反式脂肪酸积区域，实际工作中要看实际的样品情况，抛开一刀切，实验室要准备好11种混标或者13种混标，做一下定性，分离反式脂肪酸建议使用HP-88色谱柱，效果会好些，共轭亚油酸不属于反式脂肪酸。
3、问：现在测奶粉的氯丙醇脂和缩水甘油酯，用AOCS Cd 29c-13的方法，发现方法里面程序B用溴化钠衍生的步骤，内标损失会很大，不太稳定，请问是否会有这样的情况，现在有什么参考文献可以做氯丙醇脂和缩水甘油酯的呢？
张老师：氯丙醇脂和缩水甘油酯，氯丙醇脂样品前处理复杂要经过样品提取、醇解、进化、衍生、提取，里边最关键的就是试剂空白，当然也存在试剂空白不稳定的情况，至于原因还在查找中。氯丙醇酯在奶粉中是存在的，燕窝没有数据，来源可能是混合植物油酯，原因没有进行深入调查。
4、问：奶粉中碘的检测，之前与同行交流过，他们有些用参考文献的方法，采用顶空的方法来做，不知道有没用过这个方法，与国标对比结果是否有差异呢？
张老师：碘是在衍生后用气相色谱检测，没有做过顶空的方法来做。AOAC即将颁布的方法是用ICPMS，它对环境、仪器自身的空白要求比较高，需要稳定2小时以上，只是做了方法验证，至于方法优化做的不是很多，以后有机会一起沟通交流。
5、问：测奶粉的增塑剂，如果参考GB/T 21911的方法来做，就是用水复溶在萃取，如果是这样的话会有严重乳化，这个要怎么解决呢？还有，如果，没有按照标准过凝胶色谱，会对结果影响很大吗？
张老师：塑化剂按21911的方法来做，复溶萃取，乳化严重，用到的溶剂是乙腈、正己烷，我们实验也存在乳化，经过高速离心后也能分离出来，建议尝试用不同的溶剂来提取。
6、问：维生素ADE的检测中维生素A的标品很不稳定，校正值比理论值小很多，如何控制？
张老师：维生素A的标品很不稳定，很容易分解，结果会偏低的，如果校正值比理论值小很多的话，第一要检查有没有校正错、有没有计算错；第二有可能贮存温度、运输温度发生变化了。
7、问：维生素B1的测定过程中酶解培养的时间是否对结果会有影响？
张老师：维生素B1如果是奶粉样品，看一下配料表没其他基质存在的话，可以不酶解，直接沉淀蛋白来提取。假如在提取过程中发现结果偏低，再去高压酶解，培养温度对结果没多大影响。
8、问：测奶粉中乳清蛋白使用哪个标准方法呢？
张老师：现在乳清蛋白的检测是没有国标的，方法一，浙江CDC的老师起草[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp]LCMSMS的方法，争议比较大，可能短期之内不会颁布实施；方法二是测5种的氨基酸，通过测总蛋白和分蛋白氮来计算出其中的乳清蛋白的比例，这是一个定性的方法，现在也没有颁布实施。