点滴不要任意打，鱼肉不要随便吃——浅谈细菌耐药性检测

chun120602

2016/09/08

私聊

生物制药

在刚刚闭幕的G20杭州峰会上，细菌对抗生素耐药性与英国脱欧、气候变化、难民、恐怖主义等5项被列举为影响世界经济的深远因素。那么，为什么细菌耐药性如此深受重视呢？
1928年，弗莱明发现了青霉素，标志着人类进入了“抗生素时代”。然而，近些年来医院抗生素的过量使用，以及因畜牧业及水产养殖行业的抗生素滥用导致我们在日常食用鱼类、肉类等动物制品时无意中摄入了过量的抗生素，这使得越来越多的“超级细菌”（多重耐药菌）出现在公众的视线中。
据《华盛顿邮报》报道，美国出现了第一例耐多粘菌素大肠杆菌感染病例。多粘菌素被称为“抗生素的最终防线”之一，而耐多粘菌素抗药菌在抗生素使用相对严格的美国出现，基本等于耐药末日已至。2016年英国政府发布抗生素耐药性噩耗，到2050年抗生素耐药性引发死亡可达每年千万！超过癌症！同样在今年，我国国家卫生计生委、发展改革委等14个部门联合印发了《遏制细菌耐药国家行动计划(2016-2020年)》。旨在为加强抗菌药物管理，遏制细菌耐药，维护人民群众健康，促进经济社会协调发展。
目前面对细菌感染，人们依然要依赖抗生素，要想克服细菌耐药，就必须“综合治理”。就抗生素的应用与防止耐药而言，目前需要的是：优化抗生素治疗——即掌握治疗时给抗生素的剂量、疗程和给药方法。同时，畜牧业领域也必须控制抗生素的使用量，以减少食源性摄入的可能。
另一方面，医院和疾控部门要加强耐药细菌监控。这是了解细菌耐药性趋势、正确制定治疗指南和恰当评定措施有效性的关键因素。不论是为测定出有效的给药量，还是要监控耐药细菌，都要进行的便是药敏实验。通过药敏实验得出的最低抑菌浓度（MIC），是控制抗生素给药剂量的重要参考依据。同时，这也是监控耐药细菌时需要参考的重要理论数据。
如今，在实验室进行药敏实验主要通过以下几种方法：
（1）纸片扩散法：含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。其直径大小与药物浓度的对数呈线形关系。判断标准遵循CLSI折点标准。
（2）稀释法：以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基进行一系列不同倍数稀释(通常为双倍稀释)，经培养后观察最低抑菌浓度。包括琼脂稀释法、常量肉汤稀释法和微量肉汤稀释法。

（3）E-test法：将抗菌药物按双稀释倍放置于 5mm×50mm塑料载体上，操作步骤同琼脂扩散法。

（4）自动化药敏测定仪：基本原理-----利用光学测量法测定抗菌药物对细菌的作用。此方法使用的仪器较为昂贵，同时需要使用大量的专用试剂盒，故只被规模较大的实验室或医院科室采用。

其中，稀释法因其能够实现仪器操作、快速批量测定、费用成本低等的特点，在大规模的实验室药敏实验中得到较多应用。稀释法中又分为琼脂稀释法、常量肉汤稀释法、微量肉汤稀释法，其中琼脂稀释法与微量肉汤稀释法被科研和药剂检验领域广泛采用。针对实验中的接种需求，目前国内外多家厂家推出了自动多点接种仪器。

上面列出的三款仪器是目前市面上具有代表性的三个品牌的多点接种仪。
有专家预计，距下一代抗感染治疗方法出现，还需要20-30年的时间。可以预见的是，这段时期内，人们面对细菌感染会变得越来越“脆弱”。有不少人，到医院里点滴不敢打，在家鱼、肉也都不敢随便吃，生怕遇到耐药细菌的时候无药可医，但是改进治疗手段以及防控养殖行业抗生素滥用都需要有可参考的剂量，否则的话只能是事倍功半。积极开展药敏实验，能够为这些手段提供最有效的理论依据。

在药敏实验这方面，西方国家起步早。近年来我国有关部门也逐渐重视起来，督促各方积极开展药敏实验，已经取得了一些进展，并还在不断的努力研究。相信在各方努力之下，耐药细菌终会被抑制，我们依然可以安心看病用药，尽情的大快朵颐！

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