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AB API5000 建方法新手求教,一种化合物

液质联用(LCMS)

  • 各位老师好,之前没接触过质谱,现在我要用质谱测一种激素类物质,查的文献都是ESI+,流动相甲醇水或者乙腈水。我现在要用AB5000自己建方法,求教:
    目前我理解的建方法大致流程是,找出离子对,质谱条件例如DP、CXP、CE之类,建液相梯度优化源参数使峰型优化,和灵敏度最高。
    那么,自己建方法,
    1 正负离子模式是根据文献定,还是实际两个模式都试一下找灵敏度高的?
    2 流动相的有机溶剂确定,甲醇乙腈都分别试一下找最好的?
    3 AB 5000针泵进样自动优化只有DP、CE、CXP的值,那么EP值需要手动调吗?
    4 源参数是手动调还是自动优化好?手动调参数之间互相是不是有影响?意思是能控制单一变量去调吗?
    5 我测的就是一种化合物,那么离子对还要找定性跟定量两个离子对吗?还是就找一个定量离子对?即母离子打碎子离子响应最高的那个?
    谢谢各位老师了!!!
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  • 东海710

    第1楼2016/12/13

    应助达人

    1,建议自己两个都找一下试试,看看响应度如何;
    2,流动相建议甲醇乙腈都试一遍,每种试剂还是有区别的;
    3,这些参数值需要自己调,找到最优的;
    4,可以控制单一变量去调
    5,看你做什么了,如果定量的话,还是需要找两个离子对,母离子响应最高的为定量离子,其次为定性离子;防止有干扰存在

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  • zjn1123

    第2楼2016/12/13

    应助达人

    AB 源参数有自动优化的功能

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  • p3150860

    第3楼2016/12/14

    嗯嗯。最开始的时候我是按照仪器说明大概设了下参数,后来用仪器自动优化了一下源参数,但是好像还没最出初随便设的效果好。

    zjn1123(zjn1123) 发表:AB 源参数有自动优化的功能

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  • zjn1123

    第4楼2016/12/15

    应助达人

    源参数基本差不多,差别不太大,比较重要的就是curtain gas,一般设30就行了,灵敏度高就再设高一些,灵敏度低就设20,25这样的

    p3150860(p3150860) 发表: 嗯嗯。最开始的时候我是按照仪器说明大概设了下参数,后来用仪器自动优化了一下源参数,但是好像还没最出初随便设的效果好。

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  • hujiangtao

    第5楼2016/12/15

    应助达人

    先找到母离子,然后打碎找子离子

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  • p3150860

    第6楼2016/12/19

    意思是源参数不需要很细致的优化吗?只是大概就行吗?

    zjn1123(zjn1123) 发表: 源参数基本差不多,差别不太大,比较重要的就是curtain gas,一般设30就行了,灵敏度高就再设高一些,灵敏度低就设20,25这样的

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  • p3150860

    第7楼2016/12/19

    您好,还想问一下。自动优化源参数时溶剂是什么?我用的流动相是甲醇水。初始梯度是10%甲醇。那么要是自动优化源参数,溶剂是纯甲醇溶还是初始流动相比例?

    zjn1123(zjn1123) 发表:AB 源参数有自动优化的功能

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  • ghb189

    第8楼2016/12/19

    纯甲醇稀释到100ppb一般就可以了

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  • zjn1123

    第9楼2016/12/19

    应助达人

    一般做FIA优化不接色谱柱,要不时间太长。溶剂用流动相初始比例就行了,反正不接柱很快就出来了。

    p3150860(p3150860) 发表: 您好,还想问一下。自动优化源参数时溶剂是什么?我用的流动相是甲醇水。初始梯度是10%甲醇。那么要是自动优化源参数,溶剂是纯甲醇溶还是初始流动相比例?

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  • hello2013

    第10楼2016/12/20

    AB QTRAP 源参数基本差不多,不需要在这个上面浪费很多时间,离子对的话,两对,一对定量,一对定性;甲醇乙腈需要都试试的,看看峰和响应,做比较;EP基本都是10,也可以自己优选一下。正负离子的话,文献参考就行,基本根据结构就能确定是正还是负了

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