ADME色谱柱的特性 ~以核苷作为标准品的全新评价方法~
键合金刚烷基的ADME色谱柱对极性化合物的保留与分离具有良好表现,因此适用于对代谢产物的分析。目前为止,我们一直是基于对10种标准物质的测定结果对ADME色谱柱特性进行评价的(参照http://bbs.instrument.com.cn/topic/6210561);本次,我们将采用全新的评价体系,以核苷类化合物作为标准物质,分别使用CAPCELL PAK ADME、CAPCELL PAK C18 AQ、CAPCELL PAK C18 MGII、2款他社杂化型ODS色谱柱及1款他社高极性ODS色谱柱(粒径均为5 μm)进行分析,考察各款色谱柱的溶出行为并进行比较。
【HPLC conditions】
Column size : 2.0 or 2.1 mm i.d. x150 mm
Mobile phase : 10 mmol/L HCOONH4 / CH3OH = 95 / 5
Flow rate : 0.2 mL/min
Temperature : 40 ˚C
Detection : UV 254 nm
Inj. vol. : 1 μL
Sample dissolved in : H2O(100 ppm each)
如图2,键合金刚烷基的CAPCELL PAK ADME色谱柱保留能力最强。根据所得结果计算得到的参数见表1。
将各款色谱柱对应的尿嘧啶核苷(峰1)、2’-脱氧尿苷(峰2 )、鸟嘌呤核苷(峰3)与2’-脱氧鸟苷(峰5)的分配系数比进行比较,可知与其他C18色谱柱相比,CAPCELL PAK ADME对应参数值最大,说明其对羟基具有优秀的识别能力;同时,将尿嘧啶核苷(峰1)与5-甲基尿苷(峰4)的分离系数比进行比较,可知ADME色谱柱对于甲基也具有适度的识别能力,因此对于疏水性化合物来说,具有与C18色谱柱同等的保留与分离能力。
进一步,CAPCELLPAK ADME对于阿糖腺苷(峰6)与腺嘌呤核苷(峰7)的分离系数比也是最大的,说明其具有优越的立体选择性,对于非对映异构体等立体异构体的分离具有优势。
综上所述,与常规C18色谱柱相比,键合金刚烷基的ADME色谱柱更适合对高极性化合物进行保留与分离,因此可将其作为C18之外的第二选择色谱柱。