05 NMT和激光共聚焦技术的比较
什么是激光共聚焦
激光扫描共聚焦荧光显微镜(laser scanning confocal microscopy, LSCM)是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。
主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。其不仅可以得到非常清晰的荧光图像,进行多重荧光标记的定位和定量分析,还具有图像三维重建、荧光共振能量转移谱测定,甚至膜电位测定等功能,成为生命科学研究的重要技术手段。
激光共聚焦的局限
NMT对比激光共聚焦
激光共聚焦技术 | 非损伤微测技术 |
使用染料和激光光源 | 使用电极或者传感器 |
需要标记 | 无需标记 |
荧光易发生淬灭 | 电极或者传感器稳定 |
测量时间短 | 测量时间可短,可长 |
半活体(有损伤) | 近似活体或者完全活体(测定无损伤) |
检测内部的离子浓度变化 | 检测跨膜的离子流速以及外部的离子浓度 |
测定种类较少,依赖于染料 | 测定种类多,可测Na+,K+,NO3-,O2等 |
测量材料不能太大,以细胞为主 | 测量材料不限,从细胞到整体都可以测量 |
只能同时测定一种离子 | 可以同时测定两种离子 |
NMT可测样品种类繁多
NMT可以同时测定两种离子