1.前言
孔雀石绿是有毒的三苯甲烷类化学物，是一种碱性染料，也是杀真菌、杀细菌、杀寄生虫的药物，长期超量使用可致癌，无公害水产养殖领域国家明令禁止添加。
孔雀石绿是水产品中常检的项目，为提高分析效率、节约成本，笔者对鱼肉中孔雀石绿的检测方法进行优化，建立了使用超高效液相色谱三重四级杆质谱联用仪快速分析鱼肉中孔雀石绿的方法。
2.实验部分
2.1 前处理方法
称取2.00g鱼肉样品（精确是0.01g），置于50mL离心管中，加入内标标准工作液，准确加入10.00mL乙腈，5g无水硫酸钠，均质1min，使用5.00ml乙腈冲洗刀头，合并提取液，超声提取15min后，4000r/min，冷冻离心5min后，准确吸取7.5mL上清液于另一离心管中，加入3g氧化铝粉（酸性氧化铝粉、中性氧化铝粉、碱性氧化铝粉进行对比），涡旋1min4000r/min，冷冻离心5min后，取1ml上清液过0.22μm滤膜，使用安捷伦高效液相色谱三重四级杆质谱联用仪进行测定。
2.2 定量离子对及定性离子对
| 化合物 | 定量离子对 | 定性离子对 |
| 孔雀石绿 | 329>313 | 329>208 |
| 隐性孔雀石绿 | 331>239 | 331>316 |
| 孔雀石绿-D5 | 334.1>318 | / |
| 隐性孔雀石绿-D5 | 337>239 | / |
2.3结果分析
2.3.1 仪器灵敏度以及线性关系
0.05μg/L 孔雀石绿和隐性孔雀石绿的色谱图
由图中可以看出，孔雀石绿和隐性孔雀石绿的仪器响应非常高，0.05μg/L的雀石绿和隐性孔雀石绿的信噪比分别为189和80.6。
在0.2-5μg/L的范围内，孔雀石绿和隐性孔雀石绿的线性良好。
2.2.4 不同净化粉对于回收率的影响
不同净化粉的孔雀石绿净化效果数据表
由以上数据表可以看出，酸性氧化铝粉、中性氧化铝粉以及碱性氧化铝粉对孔雀石绿的净化效果相差不大，外标和内标的回收率基本相同
不同净化粉的隐性孔雀石绿净化效果数据表
由以上数据表可以看出，酸性氧化铝粉、中性氧化铝粉以及碱性氧化铝粉对隐性氧化铝粉的净化效果相差不大，但是外标和内标的绝对回收率由高到低依次为酸性氧化铝粉>中性氧化铝粉>碱性氧化铝粉，酸性氧化铝粉的回收率比碱性氧化铝粉的回收率高40%。
由于鱼肉中孔雀石绿通常会转化为毒性更强的隐性孔雀石绿，而且鱼肉中常检出隐性孔雀石绿，很少检出孔雀石绿，因此采用酸性氧化铝粉对样品进行净化能够达到更好的效果。
2.2.5 酸性氧化铝粉的净化效果
1.0μg/L孔雀石绿和隐性孔雀石绿标准溶液色谱图
空白样品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿色谱图
空白样品中添加1.0μg/L孔雀石绿和隐性孔雀石绿的色谱图
由以上三张图片，能够看出，该处理方法能够到到国标《GB/T 19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》要求的0.5μg/kg的检出限。
2.结论
综合以上数据，笔者得出以下结论：该检测方法快速、简单、节约成本，与《GB/T 19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》相比省去了SPE柱净化和旋蒸浓缩的步骤，大大缩短了分析时间，同时应用酸性氧化铝粉能够达到更好的效果。
应助达人
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