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为何在正相色谱条件下不容易在给定样品的保留时间上获得重复性较好的结果?
Kromasil鲲霆
2017/09/22
私聊
厂商论坛
在正相高效
液相色谱
工作模式下出现多变的保留时间,是因为样品的保留情况主要取决于在移动相中的高极性组成成分,特别是水的影响。即便没有特意在移动相中加入水分,即使是非极性程度很高的溶剂中也总会有少量水分溶解其中。此外,纯硅胶基质的吸水性非常强,其表面会吸附住一定的水分。因此,在正相色谱系统中水分的含量会差别很大而难于控制。最好的结果,比如,重复性较好的样品保留时间,是在使用半饱和移动相时获得的。得到半饱和移动相的一个直接方法是将移动相平均分为两部分。在第一部分(比如,500毫升)中加入2-3毫升水并搅拌混合30分钟,多余的水分用分液漏斗去除,在所得水饱和溶剂中加入原先均分的另一部分干溶剂(500毫升)。
即便使用半饱和移动相也会在很大程度上缩短色谱柱的平衡时间。正相预装色谱柱的平衡,特别在处理纯硅胶填料时,还可能需要耗费几个小时。此外,极性基团键合型固定相,例如氰基或二醇基,通常很少会受移动相内水分含量变化的影响,从而很快达到平衡状态。
25℃下一些有机溶剂中的水溶解度数据:
正庚烷:0.0091%(质量比)
乙酸乙酯:2.94%(质量比)
甲苯:0.0334%(质量比)
甲基叔丁基醚:1.50%(质量比)
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kromasil爱湾
第1楼
2017/09/29
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