液质API3000负离子模式下的校准

液质API3000负离子模式下的校准

2017.12.02做氯霉素方法时，发现找不到母离子，偏差很大，母离子是320，扫描出的是325。过了周末，2017.12.04用校准液进行校准，校准液信息

校准步骤：
打开软件，连机

1. 在Hardware Configure菜单下，激活Mass Only

2. 点击左边工具菜单Navigation Bar的Tune进入调谐模式：

3. 按上方工具条的T钮，使仪器进入Tuning状态，此时应听到“扑”的一声，Exhaust及Gas1/2已打开，仪器处于Ready状态,软件右下角硬件图标为绿色。

4. 双击左边工具菜单Navigation Bar中的Manual Tuning，打开一个空白质谱参数设置及运行窗口，进入手动调谐模式。

5. 进入手动调谐模式后，调出已有的质量校准方法，其路径是API Instrument→Acquisition Methods→API3000→Q1NEG

6. 该方法会出现在Tune Method Editor下替换现有的质谱参数设置运行窗口内容：

7.在质谱参数设置及运行窗口中回到MS method。点击start，用MCA ON方式采集10Cycles（只需10张就可以满足要求了）。数据采集时在窗口下部会出现两个实时数据图：左边是总离子流图，右边是质谱图。

8.扫描结束后，在右边质谱图中按鼠标右键出现一菜单，选菜单中Open file,得到几张不同扫描区的独立质谱图。点亮其中一个PPG质谱峰的图（此图边上会加蓝框）。

9.然后再Tool菜单中选Calibrate From Spectrum钮（或在工具条下点击Calibrate From Spectrum）。

10. 出现Mass Calibration Options窗口，选择负离子模式，点击Start键：

11.查看校准结果：

12，如果得到的数据校准不理想,某些PPG峰超出分辨率范围，应进行手动调整。关闭质量校准窗口，回到质谱参数设置窗口，点击Resoultion,标签，找到Advanced按钮，出现Offset表，调整Offset值会影响分辨率，峰宽大增大，峰宽小减小，当Offset值改变后，按Apply钮，并在开始采集前按Yes确认保存这些修改。在采集数据，然后校准，确认分辨率是否有所改善，重复此步骤，直到所有离子合乎分辨率范围。每次调整Offset值，要微调。这个步骤说起来简单，操作起来非常费时。

13.质量校准：当Offset值设定合适，所有PPG离子的分辨率在范围后，进行最后的质量校准。再采集一次PPG校准数据，并计算分辨率及质量偏差。如果质量偏差在±0.1amu范围内，新的校准视为通过，不用重新校准，如果有离子质量偏差超出±0.1amu，在Mass Calibration Report按Replace(替换）或Update钮进行修改。在下面红色圆圈处找向右的箭头。软件系统会提示是否用新的校准曲线替换已存在的校准曲线，回答Yes。或点击下图的Editor,进行更改。

在校准过程中，还出现了一个很诡异的现象，刚才时上次校准时间显示是2017.8.26，改变几次Offset值后，Mass Calibration Report窗口的校准时间显示为1899年。校准过程对于有经验的人来说可能是轻而易举的事。但对于一个初学者，还是把步骤详细记录下来，一方面整理一下思路。另一方面，方便同事学习，少走弯路。总结的可能有不足之处，希望有经验的版友多多指教！