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标准曲线线性不好

Fanny1991

2017/12/23

液质联用（LCMS）

求助各位大神，我的标准曲线每次跑出来都不成线性，每次都是低浓度点低于理论值很多，甚至计算不出浓度。液相系统是安捷伦1290，质谱安捷伦6495。
标准曲线浓度点设置为1 2.5 5 10 25 50 100 200 400ng/ml，前3个低浓度点都低于理论值，计算出来的浓度为0，准确度为0.0%。去掉1 2.5 5ng/ml三个点后，用10 25 50 100 200 400做标准曲线，仍然是前面的低浓度点偏低，这是什么原因呢？
其他条件：
1. 内标物出峰稳定，波动不大
2.同一个浓度点三次峰面积稳定性也可以
3.后来改为1 2 4 6 8 10 20 40 60 80 100 这样的标准曲线，仍然是同样的问题
考虑可能存在的问题：
1.标曲配置的问题，我用的是逐步稀释法，但是配过很多次都是同样的问题，低浓度偏低
2.仪器不稳定，高浓度点响应值偏低，导致线性斜率降低，将低浓度点画在了线下。但是怎么确定是我仪器的问题呢？

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海藻糖

第1楼2017/12/23

你好，有三个问题可以考虑：1. 化合物是否稳定,若存在，低浓度点表现明显；2.化合物是否存在吸附问题，若存在，低浓度点会偏低；3.可以尝试加权线性拟合（如1/x2），兼顾低浓度点。

0

Fanny1991

第2楼2017/12/23

化合物是稳定的，也不存在吸附作用。采用权重后标准曲线方程是改变了，不过貌似算出来的结果和原来还是一样。。。
海藻糖(v2739361) 发表:你好，有三个问题可以考虑：1. 化合物是否稳定,若存在，低浓度点表现明显；2.化合物是否存在吸附问题，若存在，低浓度点会偏低；3.可以尝试加权线性拟合（如1/x2），兼顾低浓度点。

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Fanny1991

第3楼2017/12/23

谢谢你的回答，我用加权后低浓度点可以了，但是高浓度点又不在范围了，打算做两条标准曲线。
海藻糖(v2739361) 发表:你好，有三个问题可以考虑：1. 化合物是否稳定,若存在，低浓度点表现明显；2.化合物是否存在吸附问题，若存在，低浓度点会偏低；3.可以尝试加权线性拟合（如1/x2），兼顾低浓度点。

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yy_0324

第4楼2017/12/24

了解标准曲线线性不好，学习了相关知识。
Fanny1991(v3229705)发表:谢谢你的回答，我用加权后低浓度点可以了，但是高浓度点又不在范围了，打算做两条标准曲线。

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hujiangtao

第5楼2017/12/25

应助达人

有可能高浓度不成线性了

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Fanny1991

第6楼2017/12/25

因为配了很多次标准品了，都是这种情况，应该不是配的问题。难道是仪器不稳定？
hujiangtao(hujiangtao) 发表:有可能高浓度不成线性了

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佑安

第7楼2018/03/26

应该是线性范围的问题，建议高浓度和低浓度点分开做标曲。

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m3009417

第8楼2023/04/01

你好找到原因l ma ?
我现在也遇到这个问题了

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Ins_01291f89

第9楼2023/06/26

解决了吗，我也碰到这种问题
m3009417(m3009417) 发表:你好找到原因l ma ?
我现在也遇到这个问题了

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