【讨论】过滤器完整性验证包括哪些方面？

起泡点实验是比较普遍的

现今制药企业使用的过滤主要有两种，板式和筒式。
筒式验证做的主要有以下几点：
1.对微生物的截留验证。
2.对有效成分的截留验证。
3.滤膜完整性验证起泡点试验。
4.可溶出成分的卫生安全性验证。
可接收标准：
1. 微生物挑战性实验菌量 107个/㎝2过滤面积
2. 无菌过滤后液体带菌量 ≤10个/ml
3. 活性成份含量变化情况 过滤后有效成份≥97%过滤前有效成份
4. 澄明度 无异物
5. 卫生安全性指标 见过滤器厂方所附资料
6. 滤芯起泡点压力（临界压力） ≥0.31Mpa

1对微生物的截留验证
1.1验证目的
用过滤含有定量指示细菌的培养基，模拟实际过滤工艺的方法来确认除菌过滤器的过滤能力。
1.2指示菌
a. 缺陷假单孢菌ATCC19146，该菌平均直径0.3μm。它不能穿透孔径为0.22μm的滤膜。
指示菌量=过滤器膜面积（㎝2）×107个/㎝2
我们所用0.22μ聚醚砜滤芯的有效过滤面积为0.7㎡
故所需指示菌量为：
7000（㎝2）×107=7×1010个
b. 缺陷假单孢菌规格为1010个/菌片，所以我们投入的指示菌量为七片菌片。
1.3试验压力及流量
a.0.2MPa
b.2L/min
1.4试验用培养基
胰蛋白大豆肉汤培养基
1.5试验环境：10000级HAVC系统环境
1.6试验步骤
a. 将过滤系统灭菌；
b. 用空白培养基浸润过滤器，之后进行过滤器的完好性试验；
c. 将此溶液用一阴性对照用无菌过滤器过滤，培养并检查无菌；
d. 将事先标定浓度的微生物悬浮液装入适当容器，并对待试验的过滤器。进行挑战试验，操作同上；
e .进行过滤器完好性检查，确认试验过程中滤膜没有损坏；
f. 培养观察结果；
g. 结果评价。
如阴性对照过滤器获得阳性结果，则试验无效；
如挑战试验的滤液中长菌，则过滤系统不合格。

2滤膜完整性验证
2.1验证目的
用于确定使用的过滤系统滤膜孔径与验证规定使用的孔径相符，完整性达到要求。
2.2试验方法
2.1.1滤芯的“预湿润”
为增加流通量，过滤芯子要用表成张力较低的液体“预湿润”。尽管湿润可能过增大压力强制进行，但为了安全，不使滤膜破损及保证充分湿润，滤芯还是应该预先浸湿。
2.2.3起泡点试验步骤
a.装上滤筒后关闭阀1；
b.旋转取下压力表，将纯水慢慢倒入过滤器；
c.当液体溢出时，将压力表装好，保证密封；
d.开启压缩空气或氮气，开启阀1，阀2；
e.缓慢加压到0.31kg/㎝2,控制30s，观察滤器的气泡处。例如，筒体连结处及O型密封圈安装不严密或者滤膜没有被完全弄湿，则将有连续气泡出现，这时应检查所有所有连接处或调换O型圈或重新弄湿滤芯；
f.若无气泡产生，则连续加压，直到在烧杯中观察有连续或稳定气泡来出现，此时所显示的压力即为最小起泡点压力。
2.2.4压力保持实验
将微孔滤膜过滤器用纯水充分浸湿后，逐步加大气体的压力至发泡点临界压力的80%，将系统密闭，在10分钟内观察并记录压力的下降情况/。继续升压，直至在过滤器下侧浸入水中的管中有稳定的气流发生。记录气泡第一次出现时压力的读数。
2.3压力保持试验及起泡点试验均以溶液表面的毛细管现象为基础。在压力保持试验中，一旦过滤系统进入正常测试状态，过滤膜充分湿润，加压并将系统封闭后，当系统施加一定的压力时，气体会从高压一侧缶低压一侧扩散，造成高压力的下降，这一现象与不同压力下气体在液体的溶解度不同有关。因此在压力保持试验中，规定了压力下降的范围，气体扩散问题将在下节作进一步的讨论。如在规定时间内压力下降值超过标准，则说明滤膜孔径超标或在使用过程中损坏，或系统出现其它漏点需要采取适当措施。在压力保持试验结束后，继续升直至在过滤器下侧浸入水中的管道中有稳定的气流发生，以确认临界压力值。此外，还应用产品进行试验以确定待过滤产品的起泡点，不应把厂方的参考数据作为唯一的判别标准。
起泡点实验装置如下图：



3对有效成份的截留验证
3.1实验对象
以药物中的XX甙为验证对象，考察其在过滤前后成份含量的变化。
3.2可接受标准
见上面工艺验证内容及可接受标准

4.可溶出成分的卫生安全性验证
4.1实验目的
验证药液经过滤系统后，过滤系统是否会对药液的卫生安全性产生影响。用该验证来保证经该过滤系统过滤药液，是安全可靠的。
4.2实验方法及结果
见过滤系统厂家所提供的，符合GMP规范要求的验证文件。
5对过滤液体澄明度的影响
5.1过滤系统虽然对药液有效成份及微生物的影响各不相同，但过滤系统对液体澄明度的影响不可忽略，故本验证还包括了对过滤液体澄明度的检查。关于澄明度的指标见上面“工艺验证内容及可接受标准表”。

板式滤器验证

我把我们做过的情况说一下：
“1.微生物挑战试验；2.滤膜完整性验证；3.澄明度：无异物；4. 卫生安全性指标 5. 滤芯起泡点压力（临界压力） ≥0.31Mpa”倒没什么问题。
只是：“活性成份含量变化情况 过滤后有效成份≥97%过滤前有效成份”
我觉得实现起来好像有一定问题，需要许多药液才可以，但是当药液非常昂贵的时候就很不好说了，而且要求连续进行三次，负责设备的同事说太过浪费了，大家都是这样进行的么？有没有发生过低于97％的情况，如果有，怎么办？
再者，这个数据从何而来呢？
谢谢！

雪中送碳呀！非常感谢！

活性成分的变化情况是不是很难做？