内标法配制标准工作溶液的困惑

我比你还菜，你说的我看不懂，我以前是按YQT31上的方法一步一步来精确配好1-5级标液并换算成mg/m2后，直接进样，看18种物质曲线线性是否大于0.995以上，还有计算的回收率好不好就行了，没想那么多。。。我是不是搞错了

不用想太复杂，内标的浓度数值大小其实你不用太管它，虽然你标曲里面的内标浓度是4ug/ml，但在仪器上处理的时候你把内标那里的值写成1ug/ml，你再看结果其实与4ug/ml是一样的。然后以同一条标曲来进行稀释的确是可以变成不同质量浓度范围的标曲。但是有个前提的是，你前处理要根据你的标准来。为了减小误差，最好你的标曲和你的样品的进样体积是一样的。还有就是，举个例子，照你上面说的 ，你的曲线范围是0.4ug/ml~10ug/ml，假如你的样品按照方法处理后，样品里面的实际值是5ug/ml，但是你现在把你的曲线范围变成了0.04ug/ml~1ug/ml，这样的话5ug/ml就超出了你的曲线范围，而且你的内标浓度比你的标曲的内标大10，这肯定是不行的。所以你必须要把定容体积改变

你的想法是非常普遍的，我教过的好多员工也都有类似的问题。
首先要明确的基本观念，如你所说，内标法用浓度和质量作为单位都是一样的，因为是比值的时候体积被约分了，这也意味着使用内标法不需要精确定容，进样体积也不用严格要求。
那么内标法就可以随意选择稀释体积吗？这显然是不合适的。原因是1、内标法不需要精确定容基于的原理是假设被测物在一定的浓度范围内其相应因子保持不变。仪器对低浓度和高浓度样品的相应因子会有不一样，对一些高活性的物质尤其明显，比如说硝基酚类、吡啶衍生物，环境检测标准对于样品中内标物的响应范围描述为校准曲线中内标峰面积的50%-200%。2、为了减少前处理带来的误差。比如说我做过建材外墙涂料检测，内标是直接加在样品中，再稀释到50ml，校准溶液以和样品相同的处理方式配置，不像环境样品是先萃取完样品再加入内标，那么前处理过程中低浓度和高浓度样品的回收率是不一样的，所以校准曲线应涵盖样品浓度，另外使用相同的稀释体积意味着使用相同的玻璃器皿，能减小测量不确定度和操作过程带来的误差。
所以标准上的线性浓度总是尽量和样品保持一致，并且配制时定容体积相近。

不大理解你的说法
1.建议你研究下 内标法的公式，一般是样液中内标浓度与工作曲线中内标浓度一致，内标法计算与外标相比就多了内标浓度比跟质量比，一般内标浓度会是一致的比值就等于1，所以只要考虑质量比值就可以，除非你样液跟工作液中内标浓度不一致。
2.仪器结果以浓度表示感觉你这样的做法无非就是想节省标品用量，就相当于把浓度降低，这个就跟内标法没啥联系了，只要你仪器检出限达得到就行。

谢谢您的解释，我大概明白了。总之就是标液定容的体积要尽量和样品前处理时加内标那一步的体积一致，然后样品的浓度要尽量落在标曲的线性范围内，对吧？

看来我就规规矩矩按照标准的方法配就ok了

还有一个疑问 我们这个方法也是先加内标，然后再进行超声、液液萃取等的后续步骤，您说的这种先加内标的方法高浓度和低浓度回收率不一样是为什么呢？ 因为标曲相对响应因子的不同？还是目标物本身浓度不同时 前处理提取效率不一样？

我们之前第一次做这个方法时，经验不足，配的标液是4ug、10ug、20ug、40ug、100ug（都定容于10ml容量瓶），但内标加的是200ug，在做回收率的时候就有回收率偏高的现象 是因为内标量和样品量不匹配导致的吗？

没错 按照标准来是对的 哈哈。我们是因为买来的标液太少了，所以为了节省标液 跟标准有些不一样。你们标液是从哪里买的呢？我们第一次买标液给了10mL的100ug/mL混标，结果第二次买标液只有10、4、2、1、0.4ug/ml的标液各1mL

谢谢，我上午自己试了一下，确实标曲里内标和目标物浓度不管怎么写，都是一样的 测出来的样品浓度也一样。 我之前没把前处理的因素考虑进来，只单纯考虑配标液的问题了。确实自己的前处理是跟着标准来的，所以标样体积和样品体积大概一致才可以，不能任意取体积；而且也得确保样品浓度落在线性范围内。

还有一个问题我一直不太明白 想请教您一下 样品中加的内标量和标曲中的内标量是否可以不一样呢？按照下图中方法里的计算公式 我怎么觉得是可以任意加内标呢？只要最后计算时候乘以加入样品里内标的质量就可以了？