【讨论】这是什么意思?

一般我们对高效液相设定主泵(通常为水)为A,从泵(通常为有机相)为B.你所问的应该是指对有机相和水的配比的梯度变化,你到编辑程序里可以进行梯度设定,首先设定时间25分钟,再设定流动相配比75%到25%,分步设定.其实意思就是刚开始你的流动相:水为75%:25%,通过你设定梯度变化经过25分钟变化为流动相:水为25%:75%,其中他们变化值和时间是成正比的. 不知道我的解释你是否理解.

把其中的75%和25%改成70%和20%就行了,开始有机相:水为70%:30%,经过25分钟,最后是有机相:水为20%:80%.

不好意思,按照你的色谱条件看,应该是指的水的梯度变化由70%到20%,其实意思和我之前说的一样,但有一点特别指出,你所配备的高效液相色谱仪是肯定有两个泵的,但老式的色谱仪只有一个泵,所以我们把流动相是按照有机相和水的一个固定比例配制的,那也就说明了不能进行流动相浓度的梯度设置,不知道我说的你是否理解.

那么做样的时候该用那种流动相呢？

对于双泵的ＨＰＬＣ就不存在这样的问题了，因为两个泵各抽取一种溶剂，再混合在一起．
我觉得程序设定应该是初始比例水：乙腈７０：３０，经过２５min后，水：乙腈２０：８０（水，乙腈各含１％乙酸）

所言＂水的梯度变化由70%到20%＂是正确的，但是其前所言比例应该是水：流动相．因为水的比例减小后，洗脱力会增强，这是梯度洗脱的目的之一．
对么？？

楼上说的对,水的梯度变化是从70%到20%

你们的高效液相是单泵还是双泵

你们使用的高效液相是单泵还是双泵的,如果是单泵,那你要满足这个实验条件就困难了