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大曹色谱液相豆丁帖之不出峰怎么办

capcellpak

2018/06/07

大曹色谱液相豆丁帖之不出峰怎么办

峰呢？我的峰去了哪里？
某天开机实验，色谱图一马平川…
峰呢？我的峰呢？要疯了啊啊啊啊…

怎么办！！！
别怕，YoYo又来帮助你了~
遇到不出峰问题：
首先，判断原因——即不出峰发生位点。
-排查方法-
将色谱柱从仪器中取下，接入两通后再次进样
★如果接两通状态下进样依旧不出峰->仪器系统出现问题
★如果接两通状态下出峰->色谱柱洗脱或平衡问题
常见原因及解决方法

-仪器系统方面导致不出峰-
1.检测器部分：
★检测方法不合适：紫外选择波长不合适
质谱荷质比以及参数设立不合适
荧光发射吸收波长不合适
样品浓度过小检测器灵敏度不够
…
->此时需要对检测方法进行优化调整
★检测器自身出现问题（如灯寿命到了）：需要咨询相应仪器工程师进行维修及更换
2.进样器部分：
★进样针进气泡导致样品并未真正进样成功，一般通过洗针即可解决
-色谱柱方面导致不出峰-
【洗脱不足】
现有分析条件无法对目标物质进行良好洗脱，需对分析条件进行调整：
★反相系列色谱柱——提高有机相比例（PS: 注意不要发生盐析哦）
★离子交换系列色谱柱——提高用于离子交换的盐浓度
★HILIC系列色谱柱——适当提高水相比例
【平衡不充分】
若使用离子交换色谱柱，或离子交换模式分析时，初次平衡需要充足的平衡时间，建议使用流动相小流速平衡过夜。

HPLC Conditions：
色谱柱： CAPCELL PAK NH₂ UG80 S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流动相：磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾2.72g溶于1000 mL水中） / CH₃CN = 45 / 55
流　速： 40°C
检　测： PDA 286nm
浓　度： 1 mg/mL
进样量： 20 μL
于是，现在不出峰的问题还是问题吗？

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capcellpak

第1楼2018/06/07

不出峰是液相分析中的常见问题之一，YoYo列举了几种情况，如果您有补充，可以留言一起讨论哦~

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