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保留时间不稳定怎么调整

恒河沙数

2018/07/03

液相色谱（LC）

检测氨基酸时用的waters Accq-Tag法柱子专门的氨基酸分析柱仪器安捷伦1260 四元泵现在分离出来的保留时间一直不稳定这是同时衍生的两个氨基酸标样该怎么调整呢
流动相A 三水乙酸钠调节PH值至5.02 B相乙腈；水=60；40
梯度
T A B
00 100 0
17 93 7
21 83 17
30 67 33
33 67 33
34 0 100
37 0 100
38 100 0
50 100 0

分
该帖子已被版主-夏天的雪加2积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖

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有水有渝

第1楼2018/07/03

应助达人

流动相A 三水乙酸钠调节PH值至5.02 B相乙腈；水=60；40
是不是pH变化太大，把流动相Ｂ中的水也用三水乙酸钠调节PH值至5.02 代替试试

0

m3145687

第2楼2018/07/04

会不会是气压不稳？

0

恒河沙数

第3楼2018/07/04

气压应该没问题我开了空调，全程保证温度都是恒温的，平衡系统前就开了四小时后面做完后再关的空调
m3145687(m3145687) 发表:会不会是气压不稳？

0

恒河沙数

第4楼2018/07/04

这个方法是waters做氨基酸的专门开发的方法已经二十年了，不过waters用的是他们的仪器他们做出来都挺好的都这么做的
不确定是不是因为仪器不同还是哪里出的问题
有水有渝(xky0230699) 发表:流动相A 三水乙酸钠调节PH值至5.02 B相乙腈；水=60；40
是不是pH变化太大，把流动相Ｂ中的水也用三水乙酸钠调节PH值至5.02 代替试试

0

夏天的雪

第5楼2018/07/04

应助达人

可能是色谱柱还没有平衡好，做第二样之前延长平衡时间，另外查看一下仪器的原因，例如比例阀等也可能造成时间漂移

0

有水有渝

第6楼2018/07/04

应助达人

那就多进几针看看是不是都无法重复，如果还是无法重复可以先检查一下仪器的梯度准确度

0

恒河沙数

第7楼2018/07/04

这两个标样中间隔了好几个样品就是说跑了第一个标样后跑了几个样品再来跑的第二个标样后面又做了一次柱子平衡了差不多1小时再跑保留时间还是漂
夏天的雪(bingwang228) 发表:可能是色谱柱还没有平衡好，做第二样之前延长平衡时间，另外查看一下仪器的原因，例如比例阀等也可能造成时间漂移

0

yy_0324

第8楼2018/07/04

学习了保留时间不稳定的调整方法。

0

恒河沙数

第9楼2018/07/05

这个在哪里学习呢
yy_0324(yy_0324) 发表:学习了保留时间不稳定的调整方法。

0

夏天的雪

第10楼2018/07/05

应助达人

先连续进样，看保留时间的稳定性，或者找个别的测试项目，重复进样，看稳定性，如果稳定性仍有问题，那么就是仪器的问题，如果没有问题，可能就是样品中的成分或者溶剂影响了柱效，或者柱子的柱效已经不行了
恒河沙数(v2753069) 发表: 这两个标样中间隔了好几个样品就是说跑了第一个标样后跑了几个样品再来跑的第二个标样后面又做了一次柱子平衡了差不多1小时再跑保留时间还是漂

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