【仪器故事】我与凝胶色谱的这些年

我与凝胶色谱的故事

心情图

在两年时间里，了解熟悉了每个组成部分的原理，结构以及仪器的应用发展。逐渐从生产线走向了客户现场，在第一现场往往会遇到意想不到的问题，需要随机应变。
蜜蜂八种黄酮检测试验
2007年左右在蜂蜜出口中，加入了八种黄酮含量的测试。当时，日本的标准是全球最高的。中国企业都需要购买进口设备，来满足分析的需求。由于市场的需求，我们开始接触到这个行业。在新郑附近的产蜂蜜基地，我们和当地农户。开始摸索试验。由于实验室条件很差，时间和紧张。我和另外一名同事披着大裳，在严寒的冬天坚持做了4天3夜的试验。终于在凌晨5点左右做出了重复结果。我们小心的呵护着柱温箱，生怕温度变化影响洗脱梯度，我们试过很多种色谱柱，寻找了最佳分离效果；我们不停的变换着流动相比例来寻求最佳效果；我们不辞辛苦去北京林业研究所追寻实验条件。但是，一个行业标准需要付出很大努力……最终，试验结果终于出来了。满心欢喜！就像在学校实验室做出重大发现一样的高兴。虽然，我没有真正意义上的试验导师。但是，最终的结果并不好。由于种种原因，用户最终还是选择了某日本品牌，匹配当时的行业标准HB。

北京林业研究所 八种黄铜之4，图片来自网络
分析与制备中的GPC/SEC凝胶色谱
公司的一楼试验车间，同事们在紧张的等待试验结果。这是某天然提纯项目在我们新的DAC设备上的最后测试。结果试验成功了。大家欢欣鼓舞，公司在天然多糖和蛋白提纯设备上迈出了一大步，订单纷纷踏来。对于，我们来说，加班也不可避免。其中，我比较感兴趣的是在每一步除试，放大，中试，再放大，分离制备产品，收集前后，都要测试纯度。这就要用到凝胶色谱。这也是我第一次接触到这个名词。从HPLC到PHPLC再到GPC，这是一个顺其自然的过程。我们现有的设备也很简单。自己搭了一台泵，一个手动7725i进样阀，一个简陋的柱温箱，一个多糖分离的色谱柱，和一个简单的折光分光检测器。软件是在某软件的基础上改进的。有了这些，简简单单的组成了一套设备。我们在这台设备上经历了很多，有成功也有失败……

驰骋在凝胶色谱路上
1，分离净化凝胶色谱
随着时间的推移，我从最传统的GPC色谱接触，只能做简单的相对分子量QC开始。慢慢地读了一些关于色谱以及凝胶色谱的一些书籍。这些特别感谢化学工业出版社出版的一系列色谱技术丛书，一共13本。我能接触到的只有4-5本。不过就是这些让我学到了很多。在08年有一次机会。我专门开始做GPC维修工作。对凝胶色谱有了进一步认识和提高。我主要负责两种设备GPC设备。一种是分离净化，应用于样品的前处理。样品前处理是一件非常重要，同时也非常复杂繁琐的一件事情。处理不好往往对后续试验造成影响，要么对分析仪器造成影响，要么对试验结果产生影响。甚至产生假的数据，假阳性或者假阴性。GPC尤其对痕量微量检测有很大帮助，在农残方面比较有名的秦皇岛商检单位就用到了这一分离净化技术。做维修应用等技术工作往往都是枯燥的无味的，来不得半点虚假。如果做不到位，仪器不会工作，数据不会撒谎。这些要求我一定要细心和谨慎判断问题以及解决问题。GPC分离净化往往涉及到回收率问题。而回收率又和分离色谱柱，进样系统，回收系统有很大关系。记得有一个用户，因为氮气量不足导致了回收浓缩设备问题，也破费了一些周折，才得以解决：原因是连接氮气的管路和氮气调节阀之间微漏造成了浓缩体积增大，回收时间增加温度过高而影响了回收率。在08-09年的三聚氰胺测试中，分离GPC扮演了非常重要的角色。
面粉中的13种添加物之一测试 馏分收集及浓缩装置
2，分析测试凝胶色谱
另一种就是我们更加熟悉的GPC/SEC体积排阻色谱。它是化学物理材料合成以及天然高分子生物分子结构研究的利器。目前商品化的主要有三种类型。第一种是我前面提到的传统校正分子量，结构简单。但是越来越有数据不足，信息少的缺点；第二种是带有在线黏度检测器的凝胶色谱，具有较好的分析机构构型的功能；第三种就是在前面两种检测器基础上添加了光散射检测器。在原理上解决了分子量准确性的问题，而且操作越来越方便。光散射的加入，使色谱有了飞跃发展。光散射的种类也非常多。有信噪比准确性能高的小角度光散射，也有应用于药物研究的多角度光散射。得到的有用信息更多更详实……

市场上的GPC/SEC产品，图片来源于网络
多检测器联用越来越多的被应用到实验室中，对于我来说需要了解的东西也很多。目前，正在做的是HPLC/GPC/SEC与DLS联用的试验连接。
努力前行，做一名合格的小学生
我与凝胶色谱相识相处也有十几年的光景。这些年来，我越来越发现自己的只是储备不够，需要加强学习。在色谱行业从业者中，我不过是一名小学生，是GPC/SEC激励着我，给我学习的动力，敢于学习新知识畅游于书的海洋；给我游历祖国的机会，每次出差在完成工作之余，我都在感慨中华地大物博；给我结实新朋友的契机，工作上遇到的每一位都是我的老师……是它陪伴我，虽然仪器不会说话，它却默默地陪我度过了最美的青春十年。

祖国大好河山