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二氢姜黄素样品,液相检测时无峰,呈基线状态,可能是何原因?

液相色谱(LC)

  • 最近领导拿来新样品,方法也是新的,让试一下。样品是二氢姜黄素。领导提供的方法是二氢姜黄素检查色谱条件:
    C18柱;柱温25℃;检测波长:385nm
    流动相A: 0.1%三氟乙酸TFA;流动相B:乙腈ACN
    洗脱:梯度洗脱,0-25min ?流动相B:5-95% ;流速 1.5ml/min
    一一按照方法设定来,但是走了五六针,跟走基线一样。很平,无波动,但是我查看了确实是打进样品了,且走其余产品没有问题。
    查了一下波长,网上给的资料是220nm,领导给的385,我都试了,都没峰,我用紫外扫描了一下,确认最大吸收波长是220和385左右,波长设定没有问题。
    我现在唯一能想到的是,是不是这里的C18柱是短柱??有没有这可能??
    备注一下,二氢姜黄素还有个同类产品四氢姜黄素,四氢姜黄素用的是长柱。
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  • 检测老菜鸟

    第1楼2018/11/19

    应助达人

    验证是不是柱子的问题可以用95%你现在的条件等度走一个。另外尽管你说你波长没问题,我还是认为你的波长可以再试试其他的,比如更低的210,甚至205,另外做检测方法秘诀是酸加酸碱,碱加酸或碱酸,再不行试试缓冲盐吧

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  • 有水有渝

    第2楼2018/11/19

    应助达人

    你进的是对照品吗,先进一个高浓度的试试

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  • 夏天的雪

    第3楼2018/11/19

    应助达人

    1,提高浓度进行测试;2,延长测定时间,3更换波长,4,改变流动性,看看其他姜黄素用的是什么测定方法,5,看是否可以直接用紫外进行测定

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  • m3116636

    第4楼2018/11/20

    进的标准品,含量百分之98的

    有水有渝(xky0230699) 发表:你进的是对照品吗,先进一个高浓度的试试

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  • m3116636

    第5楼2018/11/20

    进的是标准品,98%,波长更换过。一样,流动性是指什么呢?

    夏天的雪(bingwang228) 发表:1,提高浓度进行测试;2,延长测定时间,3更换波长,4,改变流动性,看看其他姜黄素用的是什么测定方法,5,看是否可以直接用紫外进行测定

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  • 夏天的雪

    第6楼2018/11/20

    应助达人

    应该是流动相,用测姜黄素之类的流动相试试

    m3116636(m3116636) 发表:进的是标准品,98%,波长更换过。一样,流动性是指什么呢?

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  • m3116636

    第7楼2018/11/21

    换成了纯甲醇,而且波长为254,柱温40℃,流速1的时候,在3.5min居然有300mv的峰……这跟方法完全不一样啊……可是方法是做这个标准品的公司提供的…………我已经凌乱了

    夏天的雪(bingwang228) 发表: 应该是流动相,用测姜黄素之类的流动相试试

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  • m3116636

    第8楼2018/11/22

    已经解决了………琢磨一个礼拜后,发现自己在设置方法的时候,没把D灯点了……只改了波长…………做了几年的qc了,居然还犯这种错误……是不是证明我不适合这行……??????

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  • 夏天的雪

    第9楼2018/11/22

    应助达人

    找到原因就行,具体的方法还是之前的?

    m3116636(m3116636) 发表:已经解决了………琢磨一个礼拜后,发现自己在设置方法的时候,没把D灯点了……只改了波长…………做了几年的qc了,居然还犯这种错误……是不是证明我不适合这行……??????

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  • lunanjituan

    第10楼2018/11/23

    没开灯的话基线要么特别直,要么噪音特别大以后细心点就好了

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