未知物的高效液相色谱方法的建立

应助工程师

如果有酶标仪可以进行全扫描，起码你可以确定你的未知样品在多少nm下吸收最大，确定好这个之后再根据物质性质来确定色谱的其他条件，如流动相，梯度/等度？色谱柱，柱温等等。

应助达人

一般用紫外单独扫下

应助达人

全波长扫描？需要用液相色谱配二级管陈列检测器或紫外分光光度计。方法建立建议楼主去看专业的书箱，如《如实用高效液相色谱的建立》

应助达人

先用紫外做全扫图，找到最大吸收波长。再设计液相分析条件。

不太建议单独使用紫外扫描光谱，如果待测物发色团在酸碱基团上，就有可能导致发生红移或蓝移，产生误差。还是建议直接使用DAD/PDA扫描，这样扫描除的光谱图就能与流动相对应起来。