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如何结果TFA流动相的基线漂移问题?

液相色谱(LC)

  • 有个物质在0.1%TFA的体系下峰形比较好看,在0.1%磷酸体系下峰形很差。但是在0.1%TFA体系下时,基线漂移严重,难以定量分析,而且如果作为图谱打给客户,客户也很难理解。
    请问有没有其余的代替方法,不会导致基线漂移的?
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  • m3116636

    第1楼2019/05/20

    我们的产品在210的吸收最高,有没有不改变波长的条件下解决基线漂移的问题?有什么可以代替TFA的吗?

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  • 浪淘沙隐

    第2楼2019/05/20

    目测你检测波长是210nm,可以试试0.1%高氯酸溶液,或者用磷酸盐体系,但更改流动相pH至4.5以上,但不能保证分离度还能满足要求。

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  • 浪淘沙隐

    第3楼2019/05/20

    说错了,应该是6.5以上pH。

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  • 检测老菜鸟

    第4楼2019/05/20

    应助达人

    具体是哪一种物质,可以参考相同基团的方法。有最大吸收也可以不用,峰型好就行。我们做给国外的客户就是这样,只要峰型好

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  • m3116636

    第5楼2019/05/20

    这个物质比较复杂,很难说找到一个参考的基团。试过其他波长,比如说,210吸收1000,220吸收550,230就只有100.200了,所以230再往上不能采取了。
    230虽然勉强可以,但是牺牲最优响应值获得的峰形结果也并不满意,因为基线还是漂移的只是减弱了而已— —

    检测老菜鸟(v3295053) 发表:具体是哪一种物质,可以参考相同基团的方法。有最大吸收也可以不用,峰型好就行。我们做给国外的客户就是这样,只要峰型好

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  • m3116636

    第6楼2019/05/20

    这个应该不行,因为0.1% 的磷酸下峰形就已经塌了,在更高的PH下基本无法分离了。

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:目测你检测波长是210nm,可以试试0.1%高氯酸溶液,或者用磷酸盐体系,但更改流动相pH至4.5以上,但不能保证分离度还能满足要求。

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  • 检测老菜鸟

    第7楼2019/05/21

    应助达人

    有时候是这样,基线很飘,不行就加点缓冲盐试试,pH调到你用TFA的时候的PH.或者你测下两个酸的pH值是不是一样,少加或者多加磷酸。或者你溶解样品的时候加一些酸进去,慢慢试吧。这种东西说实话我们没有理论依据,只有试验。

    m3116636(m3116636) 发表: 这个物质比较复杂,很难说找到一个参考的基团。试过其他波长,比如说,210吸收1000,220吸收550,230就只有100.200了,所以230再往上不能采取了。
    230虽然勉强可以,但是牺牲最优响应值获得的峰形结果也并不满意,因为基线还是漂移的只是减弱了而已— —

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  • m3116636

    第8楼2019/05/21

    好的谢谢

    检测老菜鸟(v3295053) 发表: 有时候是这样,基线很飘,不行就加点缓冲盐试试,pH调到你用TFA的时候的PH.或者你测下两个酸的pH值是不是一样,少加或者多加磷酸。或者你溶解样品的时候加一些酸进去,慢慢试吧。这种东西说实话我们没有理论依据,只有试验。

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  • 浪淘沙隐

    第9楼2019/05/21

    很多时候,峰形不好是由于流动相pH值在待测化合物pKa±2范围内导致,0.1%TFA水溶液的pH大概是1.95,0.1%磷酸水溶液pH大概是2.3,如果是这个原因导致峰形差,那么猜测待测物pKa大概是4.0~4.3,那么流动相选择pH6.5以上的,就能得到良好的峰形。当然,这时候由于待测物极性增大,保留肯定会减弱。
    如果不想用较高pH的流动相,也可以尝试用0.1%高氯酸水溶液,这个pH是1.0以下的。

    m3116636(m3116636) 发表: 这个应该不行,因为0.1% 的磷酸下峰形就已经塌了,在更高的PH下基本无法分离了。

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  • 检测老菜鸟

    第10楼2019/05/21

    应助达人

    学习了。

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表: 很多时候,峰形不好是由于流动相pH值在待测化合物pKa±2范围内导致,0.1%TFA水溶液的pH大概是1.95,0.1%磷酸水溶液pH大概是2.3,如果是这个原因导致峰形差,那么猜测待测物pKa大概是4.0~4.3,那么流动相选择pH6.5以上的,就能得到良好的峰形。当然,这时候由于待测物极性增大,保留肯定会减弱。
    如果不想用较高pH的流动相,也可以尝试用0.1%高氯酸水溶液,这个pH是1.0以下的。

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