硒代蛋氨酸(Se-Met)纯度测试
送样者提出需要测定硒代蛋氨酸纯度,我们找到了电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)及(液相色谱耦联质谱)LC-MS仪器,还有购买的硒代蛋氨酸的标准样品。将样品称量3份,超纯水溶解后定容,使用ICP-MS及LC-MS,分别测定计算,得出其合成的硒代蛋氨酸的纯度。结果如下:
表1 使用ICP-MS及LC-MS测定硒代蛋氨酸纯度
测定方法 | 1#/% | 2#/% | 3#/% | 均值±SD/% |
ICP-MS | 97.8 | 83.5 | 113.3 | 98.2±14.9 |
LC-MS | 105.8 | 92.6 | 90.6 | 96.3±8.2 |
从表中结果可以看出,两种仪器测试结果相近,总体上ICP-MS方法结果稍大,为98.2%,偏差为14.9%(比LC-MS稍大),而分析两种测试方法的检出限,ICP-MS的检出限可达到0.2ng/mL级别,而同样条件下,线性最低点0.19µg/mL浓度的标准样品在LC-MS上的出峰强度已经低至接近检出限响应,即ICP-MS监测Se-Met的灵敏度比LC-MS高出约3个数量级。由于氨基酸在ESI离子源的雾化效率比较低,灵敏度较低,而因硒元素的存在,这个化合物可以在ICP-MS上有很好的响应。
另外,发现做纯度检测试验,理论上很简单,实际操作起来却并非如此。由于待测试样均一度差异(外型呈晶体状、粉末状或者块状),提供量有限(毫克级别),样品本身易吸潮,因此其存放需要防吸潮或者潮解,保证质量恒定准确。而接下来的称量和溶解过程,也需要注意把误差降至最低,我们使用了十万分之一天平进行样品称量,防止称量误差。不然这些偏差很容易反映到结果上面。