记一次成功的全血稳定性试验

歪果仁zZ

2019/10/24
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液相色谱（LC）

记一次成功的全血稳定性试验

本周已经是第五次做右佐匹克隆全血稳定性试验了，由于此药非常不稳定，因此全血稳定性数据很重要，牵扯着我们在血浆中测定的药物浓度是否为真正的右佐匹克隆在人体全血中的含量。前几次做全血稳定性得出一个结论，这个试验还是很费柱子的，我们有一根资生堂CAPCELL PAC MGIII的色谱柱被堵塞了。由于全血需要在水浴中孵育3个小时，存在红细胞破裂的现象，导致3小时的全血离心后真实存在为暗红色血浆，这样极大的影响了后续的血浆样本处理，进而堵塞色谱柱。关于具体实验步骤可浏览我之前发的分享帖：浅谈LC-MS/MS药动学方法学考察中的全血稳定性实验https://bbs.instrument.com.cn/topic/7346669_1。
而本次分享主要分析结果数据。
右佐匹克隆的主要水解产物和代谢产物均为ACP，此物质也是代谢产物的水解产物，而如何保持右佐匹克隆这个药物在样品处理过程中稳定存在，是我们的实验目的和基础，那么同时测定ACP的含量即可验证这一目标。
在此次实验中，我们做了两组对照实验，一组是空白全血，加标准溶液后孵育；另一组则是加了“秘方”的全血，加标准溶液孵育。
到了特定的时间，我们模拟人体取血的过程，将孵育了一段时间的全血取出，在离心机4000rpm离心取血浆，后样品处理。最终得到的结果如下图所示。我们可以发现ACP的含量在最低定量限以下，且是20%以下。并且空白存在小吸收的干扰，可以证明ACP在30分钟内不会因样品降解和水解而产生。且不会对右佐匹克隆药物含量测定的真实性产生影响。
但我们同时发现，右佐匹克隆的含量却随时间的延长而增加，那么原因在哪里呢？是没有充分混匀吗？我们在取血前会在轻微振荡器上震荡。当我们咨询教授后才了解，可能是随着时间的推移，我们的红细胞破裂，从而产生基质影响右佐匹克隆的含量。
那么今天的分享到这里就结束了，感谢仪器信息网提供原创大赛平台让我互相学习分享！有老师专家对我的实验产生疑惑，可以在底部留言。