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如何设计样品的梯度洗脱过程

  • tokki0119huhu
    2019/12/09
  • 私聊

测试版面

  • 样品是 酪蛋白磷酸肽 流动相是 水 乙腈 磷酸缓冲盐 需要进行梯度洗脱 进行分析
    +关注 私聊
  • junxi2008

    第1楼2019/12/09

    这是我在网上搜索到的答案,希望对您有所帮助。
    时间 A B
    0 80 20
    10 10 90
    14 10 90
    14.1 80 20
    20 80 20
    这个例子能说明你的问题,前面0-10分钟采用的梯度是等比例的把A80%和B20%变换成A10%和B90%,而当10分钟时,已经变换成了A10%和B90%,这只是梯度变换成了这个比例,实际上,因为液相色谱的死时间问题,在柱子中的比例还没到这样的比例,再就是现在这个比例应该是有机相最多的时候,这时会把一些难于洗脱的物质洗脱出来,一般还需要几分钟的时间吧,然后过了四分钟,觉得洗脱完全了,就在14.1分钟立即把梯度换成了A80%和B20%,接下来其实现在已经不在分析样品了,是在平衡系统了。在实际运行中,我做的这个梯度只有14分钟再加上大约2分钟的死时间,也就是说大约16分钟的时间是整个样品中的谱图正常时间,16分钟之后不可能再有峰出来了,如果有峰说明方法梯度设置有问题了。

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