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蛋白膜的性能与其中的巯基和二硫键含量息息相关,本人也看了很多测定二硫键的方法,但在方法描述上不一,版本众多,不知有哪位高人可否贡献一下方法,感激不尽!

  • nizhongwen
    2020/01/19
  • 私聊

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  • 蛋白膜的性能与其中的巯基和二硫键含量息息相关,本人也看了很多测定二硫键的方法,但在方法描述上不一,版本众多,不知有哪位高人可否贡献一下方法,感激不尽!
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  • wangjun53022263

    第1楼2020/01/19

    取磷酸化反应混合液2ml,加入10ml pH=8.0的Tris盐酸缓冲液和0.05ml Ellmans试剂(5,5-二硫双(2-硝基苯甲酸)),迅速混合,室温下显色20min后,测定其在412nm处的吸光度。实验中以不加样品、而加Ellman试剂为空白,以不加Ellman试剂、而加样品的溶液测定其浊度。样品中浸提出的蛋白质用福林酚法比色测定。则样品中SH含量的计算公式如下:
    SH(μmol/g)=(73.53?A412?D)/C
    式中,A412—有DTNB存在时样品吸光度-无DTNB存在时样品吸光度;D—稀释倍数,对于SH,D=3.02?5=15.1;对于二硫键,D=(3.05/0.2)?5=;C—样品中蛋白质含量,g。

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