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色谱图重现不出来

kite503

2020/01/19

在戴安P680上做的，我的目标峰出峰时间在30和82分钟，现在我要重复一下我的实验，却怎么也做不出来原来的色谱效果，并且出峰时间变成了10和50，什么都是一样的，最开始怀疑是样品的原因，结果重新制样还是不行，后来怀疑是流动相，再新开一瓶色谱纯甲醇还是这样，最后我换到戴安U-3000上做，结果目标峰出峰时间为8和40，说明不是仪器的原因，比例阀应该没问题，也结了废液一分钟又一毫升。
样品的因素也排除了，流动相也排除了，仪器也排除了，所有的都是用同一根色谱柱，同样的预柱，同样的梯度，2011年12月21号做的始终重复不出来，求高手指点？难道是柱子的原因，我理论塔板数针对80分钟的峰还有一万多，可能性应该不大。哎。。。。。。。。。。
另外柱温，流速等色谱条件都没变柱子使用中也冲过2个多小时。流动相是甲醇和0.1%的磷酸，0.1%磷酸每天使用前新配！
是不是柱子不行了，这些目标峰原来的理论塔板数都是2,3万，现在都是2,3千了？

kite503

第1楼2020/01/19

可能是你第一次做的时候色谱柱没平衡好！

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