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液相色谱问题

xmgulong

2020/02/04

某同学在色谱分析前要配置流动相甲醇-水（40:60）1000ml，他用1000ml量筒，有时量取400ml甲醇，然后直接加从纯水机接出的水到1000ml，有时先量取600ml上述纯水后，再加甲醇至刻度，但此后均轻轻晃动几下量筒后即将约500ml溶液倒入储液瓶中，并开机进行色谱柱的平衡，在后续色谱条件优化中，发现“流动相中甲醇比例越高，保留时间越长”，以及“相同流速的情况下柱压虽较稳定，但只要一换流动相就明显不同”的怪异现象。请指出该同学操作中的不正确或不规范之处，并解释这两个现象可能的原因。

xmgulong

第1楼2020/02/04

首先1，配制流动相，40:60就是准确的体积比，而不是先量取一个，用另外一个定容，考虑到甲醇和水的密度问题，1+1不等于2。所以每次配制出的流动相的比例不是40:60。其次2，在进去液相前，流动相最好进行脱气处理。不脱气的话问题也不大，液相都有在线脱气系统呢，但是承载量有限。

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