chen04252003
第1楼2020/03/30
1、新柱的处理:我们每次新买的柱子虽然是经厂家测试过并密封好 的,可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了,因此,我们每拿 到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。首先,是配制好 65% 的乙腈/水,再把色谱柱正确的连接在色谱仪上,出口放空(注意: 出口端切不可连上检测器,以免污染了检测器) 以低流速 , 0.1ml/min~0.5ml/min(如果是 LC/MC 柱子,则应以 0.3 ml/min 进行) 均可,不可以高流速进行,等看见柱子出口有液体流出后,过 20 分 钟后再接上检测器,以循序渐进的方法将流速调至 1.0ml/min(如果 是 LC/MC 柱子则应以 0.3 ml/min 进行),继续冲洗 2~8 小时。 2、新柱的使用:首先我们确认所分析样品流动相的 PH 是不是在色 谱柱 PH 的耐受范围之内,以免损伤柱子!如果,确认在柱子的使用范 围之内,就用做样品的流动相平衡柱子(如果流动相中含用缓冲盐溶 液,在平衡柱子之前务必要先用 5%甲醇或 5%乙腈去过渡 30 分钟以 上。再用带盐的流动相去平衡色谱柱。)当色谱柱平衡了足够时间, 基线非常平稳的时候,方可进样分析。 3、色谱柱清洗:①如果样品分析中只用到一般的乙腈、甲醇和水的 流动相,在做完样品之后可直接用 55%~65%乙腈/水或者用 55%~65% 甲醇/水冲洗色谱柱 40~80 分钟,然后以纯甲醇或乙腈冲洗 30 分钟, 即可保存;②如果样品分中流动相里含用缓冲液或酸或离子对试剂的 流动相,在做完样品之后的清洗必须按照如下步骤进行清洗柱子:先 用 5%的甲醇/水或 5%的乙腈/水,以 1ml/min,冲洗 1.5 小时以上(如果 色谱柱更长, 则还需要增加适当时间);然后用 55%甲醇/~水 65%/水冲 洗色谱柱 30~60 分钟.最后用甲醇或乙腈以 1ml蒸馏水/min 冲洗 30 分钟。 备注:甲醇、乙腈要用色谱纯。水用是重 |