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液相色谱峰分不开

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  • 黄酮类成分,不知道是不是同分异构体的选择,12到17.5分钟那一段真的试了好久,也用了酸水等度梯度,甲醇乙腈,不知道怎么搞

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  • 987321654

    第1楼2020/04/13

    你用的应该是4.6*250mm 5um的色谱柱,感觉已经快分出来了。
    我觉得这根柱子能分出来,就先不换柱子,如果换的话就上核壳的柱子。
    首先观察到保留时间很短,RT=15min,先调pH(推荐磷酸)尝试增强保留,降低有机相比例,使RT增加以增加塔板数。
    观察到峰宽比较大,RT不大,证明选择性较差,是甲醇就加乙腈以改变分离因子,上磷酸、磷酸盐以增加离子强度,减小峰宽。
    调梯度放到最后。
    微调可以试试增大柱温。

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