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HPLC部分应用中的最新进展及有关问题--牢记HPLC使用者的初心和使命

艾jx

2020/05/05

HPLC部分应用中的最新进展及有关问题

----牢记HPLC使用者的初心和使命

最近几年，HPLC的应用发展很快，各行各业对HPLC的需求量猛增;我国HPLC的年需求量达20000台，其中中高档的HPLC年需求量约10000台以上，全球需求量约55亿美元以上。很多原来用紫外光谱仪器分析检测的工作，都因为HPLC具有高速度、高分离效率、高灵敏度的特点，而纷纷改为用HPLC分析检测。目前，HPLC在食品、药品、环保、农业、工业等领域的科研、生产、质量控制等方面被广泛应用，具有广阔的应应用前景。一、HPLC部分应用进展

由于HPLC采用先进的检测技术和分析方法,可对流动相、固定相进行调节或改变,采用梯度洗脱、柱切换等技术，特别是梯度洗脱的高效液相色谱法,能分析较宽极性范围的样品,较等度洗脱具有很大的优势;对于成分较复杂、极性范围更宽的样品，采用多柱高效液相色谱法或称多维高效液相色谱法也能解决有关分析检测问题。

HPLC法还可以改变固定相种类、键合度、粒径、柱长、柱径等，以及改变流动相种类、浓度等，再加自动化、智能化及联用技术上的发展，HPLC的应用在高效液相色-质谱联用、高效液相色谱-核磁共振联用、高效液相色谱-各类光谱联用等方面的应用也得到了大发展。

最近流行的智能多柱高效液相色谱系统，利用切换技术的模块式分离性能,把样品分块的切换进不同性质的色谱柱,再用合适的流动相洗脱，全过程采用智能化控制，应用效果非常好。

总体而言，HPLC近几年的应用进展很快，下面主要介绍近5年内，我国科技工作者在HPLC应用中取得的部分进展:

1、2019年，胡伟等报道：他们首次在国内提出，将HPLC(DAD检测器)与超声萃取联用技术应用到彩泥(造塑粘土)产品的分析检测工作中。

2、2019年，徐可等报道：他们研究了用HPLC外标法，测定盐酸二甲双胍片的含量。盐酸二甲双胍片是一种双胍类口服降血糖药物，用于不能单纯靠饮食控制的Ⅱ型糖尿病人。

3、2016年，窦金凤等报道：他们用HPLC法同时测定健胃愈疡片中靛蓝和靛玉红的含量。

4、2017年，北京市理化分析测试中心等的勾新磊等报道：苯并三唑类化合物：2-(2-羟基-5-甲基苯基)苯并三唑(UV-P)、2-(2-羟基—3，-5-二枯基苯基)苯并三唑(UV-234)、2-(2-羟基-3-5-二叔丁基苯基)苯并三唑(UV-327)、2-(2-羟基-3，5-二叔戊基苯基)苯并三唑(UV-328)、2-(2-羟基-5-叔辛基苯基)苯并三唑(UV-329)等，具有一定的毒性，能引起皮肤过敏、引起皮炎，并且影响生物体的正常生长、影响塑料制品的使用寿命。

5、2018年，北京市理化分析测试中心等的王尉等报道：他们采用HPLC测定了苜宿根系样品中脱落酸(ABA)的含量。

6、2018年，王韦岗报道：他们建立了固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗残留量及条件优化的方法。

7、2019年，杨华等报道，5-三磷酸腺苷(ATP)是肌肉收缩的唯一直接能量来源，是生物体组织维持正常生命活动所必须的能量物质，二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)是引起疲劳的重要因素之一，可以说 ATP、ADP、AMP与生命活动息息相关。

8、2019年，杨璐等报道：国家标准GB/T25277-2010规定的HPLC检测塑料中的芥酸酰胺，检测灵敏度低。

9、张朝辉等报道：托吡脂具有抗神经兴奋和抗惊厥作用，主要用于抗癫痫和偏头痛的治疗。由于HPLC具有高速度、高分离效果、高灵敏度等优点，目前几乎所有需要分离的大分子(分子量大于300以上)有机物的分析工作，它都可以发挥优势，因此HPLC的应用发展也非常快。由于篇幅所限，本文不能更多的介绍，但是，可以预言，HPLC的应用，将在“农、轻、重、海、陆、空，吃、穿、用”等各个领域、各行各业无所不在、无所不有，非常值得重视。二、几个有关问题

1、要打破崇洋媚外的思想、大胆使用能满足使用要求的国产HPLC

目前，我国上海伍丰公司、浙江福立公司、上海科哲等都能生产UHPLC，质量都能满足使用要求，性价比大大优于进口产品。特别是上海科哲公司推出的高校液相，其性能指标、性价比都优于进口的UHPLC。

但是，国人就是要花大价钱去买进口UHPLC，实在是令人费解。在我国的政府招标过程中，国产HPLC多次中标战胜国外品牌的例子很多，例如：对三聚氰胺建立国标时，招标过程中，在难以决定取舍的情况下，采用比对测试方法，结果国产HPLC仪器的测试数据非常优异，一举战胜国外名牌公司的产品。专家们根据比对检测数据的准确性、仪器的性价比等评价仪器的标准，一致通过采用北京普析通用公司的L6(目前升级为L600)，作为三聚氰胺建立国家标准的仪器。

此间，国产HPLC打败了两家国外名牌公司的进口产品，成为我国三聚氰胺国家标准中推荐的唯一国产HPLC仪器。作者认为，我国国产的HPLC基本上都能满足使用要求。我们中国的科技工作者应该从民族高度看国产仪器和进口仪器。要大胆使用能满足使用要求的国产仪器(但是有极少数仪器离真正能满足使用要求还有差距，使用者在购买HPLC时应该高度重视之)。

我们千万不能盲目迷信外国产品，当然盲目排外也是不对的，目前我国还不能生产的仪器，特别是有些高端HPLC，我们还是应该进口，并且一定要消化、吸收，为我所用。我们应该大胆的以质量取胜，让国产品牌的HPLC与进口HPLC在中国的市场上“共舞”，逐步让国产HPLC占领我国主市场。

2、关于中国HPLC仪器和应用创新的切入点

作为一个年长的科技工作者，以作者多年研发和使用HPLC的经验和教训，作者认为，目前我国的HPLC生产企业和应用领域，还应该加强技术上的创新、打破陈旧的思维、跳出常规的束缚、并大胆的创新。

目前我国已经有不少企业生产HPLC仪器，但是，我国HPLC的主市场仍被外商占领，这是反常的现象。究其因，作者认为主要问题是HPLC仪器生产企业中，有不少人致力于模仿国外的产品，跟在洋人后面研发、生产HPLC，同时国内同行之间经常在搞低水平的重复。

而在HPLC应用方面，使用者缺乏大胆创新精神，总是从文献来到文献去，迷信洋人的工作，特别是在分析方法创新、分析条件选择创新方面，更是存在缩手缩脚的问题等。上述这些问题，可能是我国HPLC仪器和应用进展不尽人意的主要原因之一。

作者认为只是模仿、只是跟在洋人后面墨守成规，是永远没有出路的。因此，建议广大HPLC仪器研发、生产者应该大胆走出去，到广大用户中去，以用户的需求作为创新的出发点或切入点，这才是正确的思路。

同时，我国的HPLC生产企业还应该进一步加强质量观念，努力提高产品质量、提高可靠性，以优异的质量赢得广大使用者的信任、去占领市场。在应用方面，广大使用者在HPLC的仪器和应用方面不应该当局外人，而应该是积极主动的参与者。

广大分析检测工作者应该主动向有关的HPLC研发、生产者提出自己的需求，主动指出产品的问题，让研发、生产者知道使用者的要求和自己产品的问题，从而研发、生产出更多更好的优质HPLC。总之，HPLC的制造者、使用者都应该大胆创新，大家共同努力为国产HPLC赶超国际先进水平而奋斗。

3、牢记HPLC使用者的初心和使命

广大科技工作者使用HPLC的初心和使命是什么?作者认为应该是“用好”HPLC。所谓“用好”HPLC，就是认真选择仪器条件，将HPLC用到最佳条件下、得到最佳分析测试数据(即得到分析检测误差最小的数据)。

而要“用好”HPLC，就必须了解一些仪器学理论，必须将仪器学、分析化学有机的紧密结合起来思考问题;要认真学习，搞清楚HPLC仪器的性能指标的物理意义，这些指标对分析误差的影响，使用者如何简单的检查HPLC的主要性能技术指标是否处在最佳状态;同时，要认真做好样品前处理，尽量排除各种干扰。只有这样，才能得到最佳分析检测数据，才能得到分析误差最小的分析检测结果，这才是分析检测工作者的初心和使命。

目前，国际上的科学家们一致公认，HPLC应用中的主要分析误差来源有五个方面：第一，样品前处理，它带来的分析误差占总分析误差的30%;第二，仪器的性能指标，它带来的分析误差占总分析误差的35%;第三，仪器条件的选择和正确的操作方法，它带来的分析误差占总分析误差的30%;第四，所用的分析方法或仪器的原理，它产生的误差(例如：光吸收类的仪器，因为非平行光产生的误差、数据处理方法等带来的分析误差等)约占总分析检测误差的2%;第五，环境的影响，它产生的误差约占总分析检测误差的3%。

这五个方面，是分析检测工作者必须要注意和重视的关键问题。只有这样，才能保证HPLC使用者不忘分析检测工作者的初心和使命。

科学仪器的创新、制造及应用水平都反映出一个国家的科技和工业实力。然而，中国作为世界级的科研仪器设备消费市场，却与其中国企业的市场占有率极不相称，大多科研仪器设备都被外国品牌所垄断。国外拿着我们的钱不断开发，我们国产仪器却无钱研发，守着巨大的市场，却占据劣势地位，成为国产高端科研仪器设备企业发展面临的共同难题。

目前，我国仪器设备历经长足发展，不论是在价格、质量还是性能上，都已经逐步追赶上国外产品。可是由于早期技术问题，国产仪器在本土不但没有竞争优势，反而长期处于不公平的竞争环境。国内的“进口好于国产”固定思维长期存在，成为国产仪器发展道路上的一大阻碍。当前世界竞争格局正在改变，新兴技术的崛起让仪器产业的发展动向更趋于智能化、便携化、绿色化。牢牢围绕“硬科技打造硬实力”这一主题，让国产仪器在不断提高自身核心竞争力的同时，加速品牌形象树立，助力国产仪器早日走向世界舞台！中国制造雄起！支持国产！新冠肺炎疫情我们走在了世界之前，我们仪器能行吗，不是靠我们的国产企业说，是靠我们的企业，科研，国家的支持。

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