37种脂肪酸测定的分离条件优化

37种脂肪酸测定的分离条件优化

二、条件优化

采用色谱柱HP-FFAP的时候，37种只能跑出来34种，其中还有几个峰分离度不好，这次改成DB-FastFAME色谱柱，按照厂家给出的条件跑出来35种，程序升温条件一：以80℃保持0.5min，以40℃/min升至165℃保持1min，再以4℃/min升至230℃保持4min。谱图如下图1：对照标准谱图发现17.755min和21.283min对应的应该是两个峰。

图1

条件二：以80℃保持0.5min，以40℃/min升至165℃保持1min，再以4℃/min升至175℃保持5min，以3℃/min升至190℃保持5min，以4℃/min升至210℃保持8min，以4℃/min升至230℃保持5min。峰开始分离开，但是分离度依然不好，继续改变程序升温。

图2

条件三：以80℃保持0.5min，以40℃/min升至165℃保持1min，再以4℃/min升至175℃保持5min，以3℃/min升至190℃保持5min，以3℃/min升至210℃保持8min，以5℃/min升至230℃保持1min。分离度有所改变，但是没有彻底分离，继续改变程序升温。

图3

条件四：以80℃保持0.5min，以40℃/min升至165℃保持1min，再以4℃/min升至175℃保持5min，以2℃/min升至190℃保持5min，以2℃/min升至210℃保持8min，以5℃/min升至230℃保持1min。分离度满足要求。

图4

小结：一般我们在做气相分离的时候，如果目标峰与杂质不能很好的分离，我们要在你目标峰出峰的温度点降低45℃保持个5min，然后再把升温速率降低，可以有效地改变分离度。