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【求助】ESI-MS能分析54000Da的蛋白质吗?

  • fujieyou25
    2007/03/24
  • 私聊

同位素及其它无机质谱

  • 我们的仪器是Agilent ESI-MS,质量分析范围是2200,有朋友拖我分析分子量为54000Da的蛋白质酶,而且他的样品还不纯,不知道能不能分析?请大虾们指点。
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  • 徐好狗

    第1楼2007/03/25

    如果能酶解的话还是有可能的

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  • fujieyou25

    第2楼2007/03/25

    没经过酶解,直接进的质谱,企图想让它带上多的电荷,使它的荷质比落在我们可检测的范围内,现在谱图打出来了,比较杂,高斯分布不明显,不知道能不能用什么方法得出其分子量?

    hoggy 发表:如果能酶解的话还是有可能的

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  • zhangjie19801

    第3楼2007/04/09

    最好先对样品进行预处理,尽量去除杂质蛋白干扰

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  • 徐好狗

    第4楼2007/04/11

    1、如果分辨力足够高的话,比如FT或者TOF,可以做重建reconstract,计算出分子峰。

    2、MALDI线性可以直接打出5万多的分子,比较方便,不过精度只有2Da左右。

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  • pingcheng

    第5楼2007/04/13

    估计很难用top-down的方法, 不过bottom-up的方法可。既首先进行酶解,然后对碎片进行检测。

    如果有高分辨质谱FTMS,可以直接分析,估计要带有20-30个电荷。TOF 也行, 估计分辩不好!

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  • fujieyou25

    第6楼2007/04/14

    已经试着做了哈,峰太杂了,而且信号也不强才10的4-5次方,这种蛋白质是团聚状的,估计没带上那么多的电荷

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  • sangshen168

    第7楼2007/06/28

    如果样品不纯的话效果不好,我做过bsa纯品,峰形强度还可以。使用的是esi-qtof.

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  • basin_1982

    第8楼2007/07/03

    可以调节溶液的pH值,使样品带上多电荷,让其荷质比在使用仪器的范围内。

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  • noexcuseluffy

    第9楼2007/08/07

    应该要媒介的吧,虽然可能形成多电荷

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  • edfwang

    第10楼2007/11/18

    目标蛋白测分子量 酶切搜库的方法用不着了
    变性条件带多电荷再去卷积吧 杂峰多 得看图才行

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