总氮220nm，样品吸光度-9.999

应助达人

纯水空白调零怎么样？参照如下检查:总氮的测定 根据国标GB 11894-1989碱性过硫酸钾消解的测定，以下具体操作。 1. 容器问题：测定前，把试管提前泡在1+9的盐酸中，过夜，包括配置试剂的烧杯,容量瓶以及比色皿，不要觉得麻烦，这真的很重要，等要测定的时候再拿出来洗，最后一遍要用一级水洗，可以不用烘干，因为溶剂是一级水，没有多大的影响。 2. 试剂问题：有国外进口的过硫酸钾肯定是好的，没有可以用科密欧的过硫酸钾和氢氧化钠，要用优级纯的，所有试剂均先配现用，氢氧化钠一定要冷了才可以倒入过硫酸钾中，过硫酸钾会比较难溶，剩下一点点不要了也没有关系。用一级水定容。 3. 消解的温度及时间：一般121℃，30min消解就可以了。 4. 测定：消解出来要趁热将比色管中的溶液多混匀几次，充分消解，然后自然冷却至室温，千万不要泡在水里冷，会有影响，等差不多了再配1+9的盐酸，加完试剂混匀后等10min在测，这个标准没有写到。然后就是按照标准的波长进行测定，如果有没有双波长的分光光度计，要先测完一个波长再测另一个.

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原因：1、大部分可能性是过硫酸钾，如果可行，建议多次提纯，控制好空白
2、根据你的多次都是9.999，极有有可能是物理性失误，检查灯光在这个光区的好坏，在275nm时可以读数，应该不是比色皿的问题。

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1、试剂的配制
　　碱性过硫酸钾的配制过程十分重要,掌握不好,会影响消解效果,对测定结果产生一定的影响.（GB11894—89）中关于碱性过硫酸钾的配制,只是简单的说将过硫酸钾和氢氧化钠溶于水中,并未作其它要求.实际上,过硫酸钾的溶解速度非常慢,若要加快溶解,绝对不能盲目加热,即使加热,也最好采用水浴加热法,且水浴温度一定要低于60℃,否则过硫酸钾会分解失效.配制该溶液时,可分别称取过硫酸钾和氢氧化钠,两者分开配制,再混合定容,或者先配制氢氧化钠溶液,待其温度降到室温后再加入过硫酸钾溶解.若二者在一只烧杯中溶于水,应缓慢加水,同时搅拌,防止氢氧化钠放热使溶液温度过高引起局部过硫酸钾失效.
　　2、玻璃器皿的洗涤
　　所使用的玻璃器皿应先用（1 9）盐酸浸泡后,再用无氨水冲洗数次才
　　能使用,否则,也会造成空白值偏高或平行性较差的情况.
　　3、消解温度、压力的控制
　　使用医用手提蒸气灭菌器的实验室,因测定压力为1.1~1.4kg/cm2,温度为120℃~124℃,消解时,（GB11894—89）中要求达到规定温度压力后即开始计时,而我的一般经验是,直接打开放气阀加热一段时间,待蒸气灭菌器内的冷空气被彻底赶尽、放出热蒸气后再关闭放气阀消解,并且将消解温度控制在123℃,这样测定结果最为理想.
　　4、比色时的注意事项
　　该项目的测定涉及两个波长（220nm和275nm）,建议在测定完一组样品的同一波长后,再调整到另一波长,统一测定,不要测完一个样品的两个吸光度后再换另一个样品,这样反复调整波长会引起一定的测量误差.
　　5、试剂的选择
　　碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮的过程中,过硫酸钾是至关重要的试剂.首先,试剂的纯度关系到空白值的高低、测定结果的准确度.一般普通分析纯过硫酸钾的总氮含量最高不超过0.005%,但由于试剂质量存在差异,有些厂家、批次的试剂含氮量常常达不到这个要求,致使空白值偏高.因此,有条件的话建议使用优级纯试剂,尽量降低试剂中的含氮量,从而降低实验空白值.
　　6、实验用水及试剂的质量检验
　　若实验的空白值不够理想,则需要对实验用水及试剂进行检验,以选择出含氮量最低的水和试剂,获得理想的空白值.
　　6.1 水的检验
　　将所有待选的实验用水分别装入石英比色皿中,分别在220nm和275nm波长处测其吸光度,按A220nm-2A275nm对对吸光度进行修正,以修正后吸光度值最小的水为实验用水.
　　6.2 试剂的检验
　　将所有待检的过硫酸钾、氢氧化钠按其在实验时消解定容后的溶液中的含量分别配成相应浓度的溶液,以此溶液作为样品,分别测定其氨氮、硝酸盐氮的吸光度,择其吸光度最低者用即可.

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-9.999说明样品在220nm处根本不透光，但在275nm处可以，因为在紫外区肉眼观察不到样品状态，只能所以有可能的原因是1、样品取样量不合适导致消解不完全；2、过硫酸钾杂质太多。建议楼主先验证下空白和标样，查看是否为试剂的问题，同时对样品多做几个梯度或者做几个地表水试试是否为样品的原因。

GB11894—89已修订，现在是 HJ 636-2012 水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法

上海优耐德（原爱建德固赛）的过硫酸钾可以试试，除了分析纯（总氮0.005%），还有超纯（总氮<0.0005%，200g/瓶）（HJ636要求总氮小于0.0005%），可以替代默克的，生产厂家tel：021-61172760*617，qq：112039595

我也碰到这种情况，只是没你这么厉害，不过读数也是负的。换一台光度计就是对的，所以你的大概率是光源也有问题了。

总氮实验空白要求0.030，为什么每次空白都高，曲线质控都可以。