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【求助】毛细管区带电泳样品缓冲液和运行缓冲液不一样怎么办？请求帮助

yanixxpay

2007/04/03

毛细管电泳（CE）

我做毛细管区带电泳分离蛋白质，蛋白质要荧光标记时用PH9.3碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液，但运行缓冲液是不同PH不同浓度的磷酸盐。不知是否会有影响，该怎么办呢？快让实验弄疯了，请各位师兄师姐传授一二，小妹刚开始接触毛细管电泳，遇到问题就很郁闷......

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wds408

第1楼2007/04/05

蛋白质要荧光标记时用PH9.3碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液
这句话不是很懂，是用pH=9.3的来溶解蛋白吗？
如果是这样好象影响不是很大吧
毕竟注射进样的时候量很少的
不知道是不是这样
还没涉及到这方面！~一般我都用同一ph的缓冲溶液~~
yanixxpay 发表:我做毛细管区带电泳分离蛋白质，蛋白质要荧光标记时用PH9.3碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液，但运行缓冲液是不同PH不同浓度的磷酸盐。不知是否会有影响，该怎么办呢？快让实验弄疯了，请各位师兄师姐传授一二，小妹刚开始接触毛细管电泳，遇到问题就很郁闷......

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yanixxpay

第2楼2007/04/05

是标记蛋白质的荧光素，标记方法要求用碳酸钠-碳酸氢钠溶液
另外，PH值相差大的运行缓冲液（酸性）来稀释标记好的样品溶液，可以吗？

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cherry39

第3楼2007/04/11

我认为影响不大，我的样品是在pH8.5介质中衍生的，CE的buffer是pH9.7，没有出现异常情况呢。毕竟进样只有几nL嘛。不知道对不对？

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