流动相加缓冲盐问题

应助达人

1.流动相没有说必须要加缓冲盐，相反，试剂分析实验过程中是能够不加就不要添加缓冲盐，能够使用有机相 纯水做流动相达到分析目的是最好的，引入缓冲盐很麻烦，既要考虑样品，也要考虑柱子，还要注意方法调试，这个在方法开发过程中给是比较麻烦的，所以能不要引入缓冲盐就不要引入，更不要说必须要引入了。
2.对于LC来说引入缓冲盐一般都是为了改善峰型，或者增加目标化合物的保留时间，添加缓冲盐的可以参考发表文献，或者根据目标化合物官能团来加入缓冲盐。

应助达人

选择正确的流动相PH值对可解离化合物分析十分重要。不恰当的pH值可能导致不对称峰、宽峰、分裂峰或肩峰，而尖锐、对称的峰是定量分析中获得低检测限，以及样品好的平行性和保留时间高重现性的前提。在RPC 中，流动相的pH 值一般在2-8之间，当被测物可解离或样品pH值在2-8之外时，往往需要在流动相中加入一些改性剂(如酸/碱/缓冲盐)以改善其峰型或保留。在选择缓冲液pH值之前,应先了解被分析物的pKa，当一种化合物的pKa=pH时，其有一半解离;当溶液pH值高于或低于pKa两个单位，化合物99%以上以一种形式存在(完全解离或完全未解离),这时有利于获得对称的峰型。因此几乎所有与pH相关的保留值变化基本都发生在pKa±2个单位的，超出这个范围，其保留值随pH变化不大。综上，如果待测组分在RPC上保留弱，则需要调节流动相pH小于(酸性)/大于(碱性)pKa两个单位，使其绝大部分呈分子状态以增加其在反相色谱柱上保留;若出现组分共流出情况，我们可以根据其各自分子结构特点来调节pH增加分离度:如一种物质含有氨基(另一种不含)，则可以降低流动相pH，含氨基组分就会发生解离减弱在色谱柱上保留，从而实现分离

应助达人

流动相没有说必须加缓冲盐，缓冲盐溶液的作用主要是调节流动相的ph，从而以控制样品的电离，一般要求缓冲溶液的ph要和待测物的ph上、下相差2以上，三乙胺，主要的作用是对色谱柱残留的si-oH基进行封端，三氟乙酸主要是控制残留的si-oH的电离，保持-oH基的完整性，使之不与待测物作用，从而在流动相中加入三乙胺和三氟乙酸的作用都是为了改善峰形。

应助达人

流动相不一定要加缓冲盐，和你要检测的物质性质有关

应助达人

缓冲盐一般来说为了增加色谱系统的缓冲容量，这个看被分析物而定
有些化合物，例如一些头孢类化合物，高浓度的缓冲盐可以优化分离度和峰型
需不需要加缓冲盐，要看这个色谱系统需要有多大的耐用性，如果只是为了看个质谱或者简单的反应跟踪，不加缓冲盐有时候也勉强可以缓冲盐还有另外一个作用：增加体系离子强度，抑制化合物解离，获得优异的峰形，并提高保留，消除柱吸附保护色谱柱
这就是不同缓冲盐种类和浓度，峰形和分离度存在差异的原因

不一定要加。

应助达人

看使用的标准，配置流动相，不是所有的都需要加缓冲盐的

应助达人

开发方法时，首选纯有机相和纯水相，不行才考虑加盐。

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