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流式细胞仪

  • Insm_9f373584
    2022/03/14
  • 私聊

生命科学仪器综合讨论

  • 流式细胞仪的前向角FSC和侧向角SSC原理是什么?
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  • JOE HUI

    第1楼2022/03/14

    应助达人

    楼主可以参考如下资料:①前向角(即0角)散射(FSC);②侧向散射(SSC),又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。


      一般说来,前向角散射光的强度与细胞的大小有关,对同种细胞群体随着细胞截面积的增大而增大;对球形活细胞经实验表明在小立体角范围内基本上和截面积大小成线性关系;


      对于形状复杂具有取向性的细胞则可能差异很大,尤其需要注意。侧向散射光的测量主要用来获取有关细胞内部精细结构的颗粒性质的有关信息。


      侧向散射光虽然也与细胞的形状和大小有关,但它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感,也能对细胞质内较大颗粒给出灵敏反映。


      在实际使用中,仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时,可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。

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  • wuyuzegang

    第3楼2022/03/14

    应助达人


    前向散射光,FSC,

    反映的是细胞的大小。

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  • 123

    第4楼2022/03/14

    应助达人

    在一定的压力下,鞘液带着细胞通过喷嘴中心进入到流式照射室,在流式照射室的分析点,激光照射到细胞发生散射和折射,发射出散射光(包括前向散射光和侧向散射光);同时细胞所携带的荧光素被激光激发并发射出荧光。

    前向散射光(Forward scatter, FSC)和侧向散射光(side scatter, SSC)检测器把散射光转变成电信号。而荧光则被聚光器收集,不同颜色的荧光被双色反光镜转向不同的光电倍增检测器,把荧光信号也转变成电信号。这些电信号再经过数据化处理后输入电脑并储存,即可对细胞进行分析或分选。

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