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求助核苷酸检测

  • Ins_97e6e388
    2022/05/19
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位老师好,液相检测核苷酸,新换的柱子,第一针峰型还行,第二针就开始飘了,流动相配制有什么注意事项吗,求帮忙
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  • robin_clhx

    第1楼2022/05/20

    可以参考一下GB 5413.40-2016标准,不同色谱柱适用的流动相不同。
    曾经用过Acclaim 120 C18的25cm液相柱做过核苷酸。
    流动相是96%的0.01mol/L磷酸二氢钾水溶液(pH 4.04)+4%甲醇等度10分钟,1mL/min,柱温是35℃,跑出还算可以的峰形;
    核苷酸工作溶液不稳定,需要从储备液开始现配现用,储备液到工作溶液的溶剂都是纯水;
    0.01mol/L磷酸二氢钾水溶液的pH值非常重要,一定要调整到这个值,如果是第二天继续用,也要先确认好pH值;
    如果是不同的色谱柱,用的pH值可能不同,但始终都在pH为4附近做的分离效果好;
    方法用到了高比例的水相,最好选一根高耐水的色谱柱,要不然柱子很快就坏掉

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  • 安平

    第2楼2022/05/21

    应助达人

    楼主详细说说具体的分析条件为好。


    具体什么流动相?

    有图么?

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