robin_clhx
第1楼2022/05/20
可以参考一下GB 5413.40-2016标准,不同色谱柱适用的流动相不同。
曾经用过Acclaim 120 C18的25cm液相柱做过核苷酸。
流动相是96%的0.01mol/L磷酸二氢钾水溶液(pH 4.04)+4%甲醇等度10分钟,1mL/min,柱温是35℃,跑出还算可以的峰形;
核苷酸工作溶液不稳定,需要从储备液开始现配现用,储备液到工作溶液的溶剂都是纯水;
0.01mol/L磷酸二氢钾水溶液的pH值非常重要,一定要调整到这个值,如果是第二天继续用,也要先确认好pH值;
如果是不同的色谱柱,用的pH值可能不同,但始终都在pH为4附近做的分离效果好;
方法用到了高比例的水相,最好选一根高耐水的色谱柱,要不然柱子很快就坏掉