【求助】挥发酚标准曲线，一天做了四五次还是不行~哭了

应助达人

萃取法的确曲线不好做，但是注意：1 萃取过程中的力度次数一定保持一致。 2 梨形萃取器排气时，不能有有液体的跑漏现象发生 3 可进行多点试验，删除不合格点，4 .做萃取法曲线的时候，4-AAP，以及铁氰化钾都是现用现配

应助达人

楼主，对于您发的图片和问题有三点疑问：
1、空白和加标颜色几乎为0，看不到颜色，具体吸光值是多少？
2、看萃取后图片的话有的分液漏斗下层是橙红色的，不过看上去浑浊；
3、具体标准曲线可以发出来看一下。
一般合格的四氨基安替比林溶液是淡黄色的澄清的，如果按照标准分析的质控要求萃取空白＜0.08。
楼主如果找原因建议直接用直接法做，萃取法太麻烦，如果显色不成线性可能是操作的问题，如果仍然不显色或者是标准溶液失效或者是试剂失效，分批更换试试，另有两点注意：1、注意显色环境，保证加完缓冲液后pH值为10.0±0.2；2、空白如果浓度过高大概率是四氨基安替比林问题，按照HJ 503-2009附录B提纯；3、如果找出原因后用萃取法做一定要注意萃取操作的一致性，即每个分液漏斗萃取振摇操作保持一致；4、萃取注意三氯甲烷质量。

感谢您，我配置好的4-氨基比林呈深红色混浊。是否应用三氯甲烷萃取再使用，或者为药品过期失效

好的，收到，初估计为4-app失效问题

我觉得应该是试剂的问题，我建议把4-APP换成进口的牌子，然后提纯下。我们当时做方法验证，买标样来做是没问题的。然后还有一个问题，做标曲的时候，最好买商品化的标液来做，之前试过买固体试剂来配，结果也是没有颜色的，后来换成市售水中挥发酚标准溶液，又可以了

4氨基安替比林需要提纯，不提纯空白很高，然后你肉眼看起来就觉得标曲的点和空白颜色很相近。另外加4氨基安替比林和铁氰化钾的时候一定要准确。