高效液相色谱仪流动相

应助达人

1、一起过滤最好。2流动相色谱级最好过滤。3流动相瓶子根据实际情况清洗。4可以把B甲醇换成乙腈，那只是个通道。5、平衡柱子，两种方法都可以，基线稳定。6、长期保存柱子，本人没有听说用纯有机相不好，暂不评论

1、最好一起过滤
2、如果色谱纯有机相注明了已过滤，可以不用再过滤；
3、一般水相和乙腈瓶会清洗，用毛刷刷一下，磷酸或醋酸水超声清洗，最后用超纯水多洗几次，频率的话因人而异，我们一般1-2个月洗一次
4、管路走那种溶剂都可以，建议相对固定下，防止变换方法时来回切换流动相；
5、等度方法用初始比例即可；梯度方法建议至少完整运行一次梯度程序

应助达人

个人认为水是现制是超纯水，甲酸又是色谱纯的，都是液体而且纯度高，没必要过滤，会增加污染。色谱纯或质谱纯的有机相更没必要过滤，出厂前都经过过滤，再过滤会增加污染风险。柱子用完后冲洗，再用时初始流动相平衡即可。

看了评论，只有你是真正操作过的，上面的评论都是些啥啊。不过平衡色谱柱我有更快的方法。如果5%~20%走梯度，那我会先用10%冲5分钟，再用5%平横10分钟左右就好了，这样第一针基本没问题。

应助达人

1.我流动相配甲酸水溶液，我应该把甲酸加入过滤好的水里，还是甲酸和水混好了再一起过滤
一起过滤
2.有机相流动相色谱级是使用不用过滤吗？
我们还是过滤。当然不过滤，做平常实验的话是没什么问题的。
3.一般流动相瓶子多久洗一次呀，怎么洗?
要看你用什么流动相，如果是盐流动相，可以用洗洁精洗就行了，用水冲。如果是有机相，不用冲洗，换流动相的时候用水冲洗晾干即可。多久洗一次要看你多久换一次流动相。也要看流动相是不是长菌了，如果长菌了，75%的乙醇冲洗。

4?实验室用的赛默飞的高效液相色谱仪，规定A相水相，B相甲醇，C相纯水或乙腈，因为我的流动相是甲酸水和乙腈，冲柱子要用纯水，所以我想把B甲醇换成乙腈可以吗？有的老师说可以有的说不可以，有什么影响吗？
可以，不影响。
5.每次实验前是用初始条件平衡柱子就好，还是需要完整的冲一次柱子呀，你们平时是怎么冲柱子的呀？从5%到100%需要梯度上升吗？还是5%冲一段时间，100%冲一段时间?
初始条件走一遍。也可以整个方法走一遍。
6.我看见有个说法是长期保存柱子不能用纯有机相，短期可以，长期用95%有机相，这种说法正确吗？
要看保存的是乙腈还是甲醇，甲醇的话不需要，乙腈可能有聚合，用95%保存更好。

应助达人

1.我流动相配甲酸水溶液，我应该把甲酸加入过滤好的水里，还是甲酸和水混好了再一起过滤---------------------------------------想要过滤的话，甲酸在过滤前添加，摇匀
2.有机相流动相色谱级是使用不用过滤吗？---------------------------------------------------------------不是看是不是色谱级试剂就不过滤，主要看试剂品质，需要点时间积累或者验证哈，国产的试剂建议过滤（没有歧视哈，实际使用总结来的），sigma的可以不过滤。
3.一般流动相瓶子多久洗一次呀，怎么洗?-----------------------------------有机相的瓶子洗不洗都无所谓，装无机相的瓶子可以考虑半个月洗一次。
4·实验室用的赛默飞的高效液相色谱仪，规定A相水相，B相甲醇，C相纯水或乙腈，因为我的流动相是甲酸水和乙腈，冲柱子要用纯水，所以我想把B甲醇换成乙腈可以吗？有的老师说可以有的说不可以，有什么影响吗？--------------------------------具体看你LC是什么型号，有些LC不同通道制造的管道不一样，有些管道是专门奶有机溶剂的，所以会专门走有机溶剂好点，U3000的话ABC管道可以随意切换有机相和水相，且建议有一定的时间频率切换。
5.每次实验前是用初始条件平衡柱子就好，还是需要完整的冲一次柱子呀，你们平时是怎么冲柱子的呀？从5%到100%需要梯度上升吗？还是5%冲一段时间，100%冲一段时间?-------------------------------平衡柱子用初始流动相冲洗就可以，进样前有时间的话跑一两针blank看看仪器状态
6.我看见有个说法是长期保存柱子不能用纯有机相，短期可以，长期用95%有机相，这种说法正确吗？------------------------------------------------应该没这说法，柱子保存主要看主子类型，普通的C18、C8纯有机相保存就可以，购买的waters柱子出厂也是纯甲醇/乙腈保存的，糖柱就需要稀硫酸保存，保存看柱子类型哈，不清楚的可以咨询柱子对应的厂家。

谢谢各位大佬的回复，我还有一个问题，跑完磷酸，甲酸的反相柱子怎么冲呀?是不是冲柱子用甲醇比较好，乙腈不适合长期保存柱子?

我一般用5%的乙腈跑20-30分钟，然后花20分钟从5%升到100%，最后用100%乙腈跑20分钟，这种做法对吗？

进来学习一下