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凝胶色谱GPC标曲、标品问题

  • Ins_d4c51abb
    2022/11/23
  • 私聊

凝胶色谱(GPC)

  • 各位大佬好,我刚接触GPC,还不是很懂。
    我在跑的是葡聚糖标品的时候,最大的分子量是302,000,跑这个标品的时候,跑出来是的是平峰,换了几个浓度,峰一直是平的(图1),跑其他分子量的时候就没问题,请教一下大家这是怎么回事?有什么解决办法吗?
    这个峰这样,有没有可能是配制过程中标品分子键断裂了?标品配制过程有什么需要注意的吗?我是配完标品放四度过夜了,样品也都完全溶解了。
    流动相是水,流速0.6ml/min,标品浓度是1mg/ml。
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  • 小不董

    第1楼2022/11/25

    应助达人

    从你其他低于这个分子量的标样色谱比较来看,在小一点的标样分离效果是很好的,但这个302k的样品出现了你说的馒头峰,有两种可能,一是样品本身不是很单一,分子量分布就是这样,还有可能就是这个分子量超过了你柱子分离极限,这个你要看看你的柱子分离范围是多少,排阻极限是多少,能否找到能分离更大分子量的柱子来分离。

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  • Ins_d4c51abb

    第2楼2022/11/25

    柱子分离范围是1000到800万,排阻极限是5千万。那这样看的话是标品不纯?

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  • 小不董

    第3楼2022/12/06

    应助达人

    如果排除柱子的问题,那就是样品的问题,你可以用其他的标准样品来验证你的柱子,或者样品送到其他实验室去测试。

    Ins_d4c51abb(Ins_d4c51abb) 发表:柱子分离范围是1000到800万,排阻极限是5千万。那这样看的话是标品不纯?

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  • CMH1025

    第4楼2022/12/07

    可以用18角度激光光散射仪来测试下,做重均分子量及分子量分布系数测定,有需要联系我们

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  • tigertooth

    第5楼2023/02/02

    有可能是标样本身问题,葡聚糖没有单分散的标样,都是多分散的,分子量大了有可能在样品制备过程会一些问题。我也买过一些标样,也有这样那样的问题,实际测出的和证书上的也有很大差异。

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