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西达本胺抑制SCLC细胞增殖和凋亡

  • Ins_7c331746
    2022/11/30
    小矮马
  • 私聊

生物制药

  • 西达本胺抑制SCLC细胞增殖和凋亡

    CCK-8药敏实验结果表明,SCLC细胞系H69H446H526DMS114经不同浓度西达本胺处理 24487296120 h后,细胞产生明显的增殖抑制现象,且随着药物浓度增加及作用时间延长,抑制作用逐渐增强,呈现出时间-浓度依赖性,如图2所示。同时得到西达本胺对四种细胞系作用72h后的IC10IC20IC50见表1-8。结果显示四种细胞系对西达本胺均较为敏感,其中,与H69相比,DMS114对西达本胺相对不敏感。


    不同浓度西达本胺作用不同时间后对H69的增殖抑制情况

    1-8 西达本胺作用72 h后达到不同抑制效果的药物浓度(μmol/L




    细胞名称

    IC10

    IC20

    IC50

    H69

    0.423

    0.632

    2.916

    H446

    0.404

    0.571

    1.033

    H526

    0.118

    0.261

    1.015

    DMS114

    1.272

    2.815

    10.943



    西达本胺改变SCLC细胞形态

    不同浓度(0IC20IC50)西达本胺作用于H69H446H526DMS114细胞4872 h后在显微镜下观察细胞形态改变如图1-3所示。随着药物浓度及作用时间的增加,SCLC细胞系形态发生了变化,细胞增殖率减低。H69团状细胞减少,单个凋亡细胞增多;H446贴壁细胞减少,凋亡细胞增多,触角伸长,形状变得不规则;H526细胞体积缩小,由片状变为球形团块,周围散在大量凋亡细胞;DMS114由椭圆形变为长梭形,细胞内颗粒物增多,可见空泡,出现凋亡小体。由此可见,低剂量西达本胺即可影响SCLC细胞形态,促进细胞凋亡,四种细胞系对西达本胺均较为敏感。




    西达本胺诱导SCLC细胞凋亡

    流式结果显示,用不同浓度(0IC20IC50)西达本胺处理SCLC细胞系48 h后,四种亚型细胞系凋亡率均上升,且与加药浓度成正比,如图1-4 A所示。48 h检测在IC20IC50浓度下H69细胞凋亡率为8.45%14.46%H446细胞凋亡率为8.88%41.6%H526细胞凋亡率为11.48%20.77%DMS114细胞凋亡率为11.83%16.07%,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)(图1-4 B)。为了进一步检测西达本胺在H69H446H526DMS114四种细胞系中的作用差异,我们用1 μmol/L的西达本胺分别处理H69H446H526DMS114细胞48h后进行流式细胞仪检测,结果如图1-4 C所示,与DMS114比较,H69H446H526对西达本胺更敏感。


    不同浓度(0IC20IC50)西达本胺作用48 hH69H446H526DMS114细胞凋亡率柱状图

    . 1 μmol /L西达本胺作用48 h后对H69H446H526DMS114细胞凋亡的影响



    西达本胺抑制SCLC细胞克隆

    用不同浓度(0IC20IC50)西达本胺处理SCLC细胞系48 h后,在细胞克隆第14天,镜下观察细胞克隆情况并拍照(图1-5 A),细胞单克隆数量随加药浓度增加而减少。各组细胞克隆形成率绘制成柱状图,如图1-5 B所示,随着加药浓度增加细胞克隆形成率逐渐减小,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。H446DMS114细胞进行了平板克隆实验,随着加药浓度的增加,克隆数明显减少,结果如图所示。


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