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纯原创-检验达人小沂哥总结的赛默飞液相3000仪器操作步骤（0基础快速上手版哦）

zhufuqiang

2022/12/22

液相色谱（LC）

经受了12年检验检测工作的磨砺（摧残），小沂哥希望自己的小小经验能帮到大家

赛默飞液相3000仪器操作步骤

一、开机

1. 打开仪器背部电源。

2. 泵排空：打开，点击，在右侧界面点击，设置流动相比例，打开泵排空阀，勾选冲洗，进行排空（5 min）。完成后，关闭排空阀。

3. 平衡系统：设置完成流动相比例，设置流速/压力，点击，平衡系统。

4. 进样单元：依次点击

5. 柱温箱：设定温度。

6. 检测器：根据情况打开紫外灯或可见光灯，此时UV模块红灯消失，绿灯亮起。此处可选择、，查看基线。

二、样品分析

1.建立数据仓：点击“开始”，在下点击“数据管理仓”，点击“创建”，输入名称，点击“完成”。

2.创建仪器方法：点击，点击“仪器方法”，在“仪器方法向导”中，依次设置“运行时间”、“溶剂”（有默认值）、“流速梯度”（选择“删除平衡阶段”）、“ 温度控制”（柱温）、“UV通道设置”（一般会显示4个通道，只勾选需要的波长和 “3DFIELD”），点击“完成”后，会自动跳转至“仪器方法”界面(在此界面可以做修订)。（在实际样品分析中，无需自创仪器方法，将其他文件夹中的方法复制粘帖于当前的序列文件中）

3.创建处理方法（不需要？）

4.创建报告模板、样品表文件（不需要？）

5.创建样品表文件-“序列”（注意与“仪器”界面中的“队列”不一样，队列是由多个序列组成）：

方法①：在“数据”界面，首先选择数据文件名（默认会保存其下），点击“创建”→“序列”→在弹出界面中输入相关信息（也可在序列表生成后修改）→将其他文件夹中的方法复制粘帖于当前的序列文件中→在序列表中输入“名称”、“位置”、“进样量”、“仪器方法”（包括冲柱方法、关机方法。此时可以选择以复制过来的方法）、“处理方法”，完成后，点击开始。（注意：冲柱方法必须要放入样品（纯甲醇），需要进样，否则不采集）。

方法②：直接打开原来的序列，修改后，另存为新的文件。

三、数据处理

1.在序列中，标识出“校准标准品”及“级别”，双击序列中任意一栏数据，进入“数据处理”界面。

2.“校准和处理方法”：出现如下图：

①“ 检测”：运行Cobra向导（注意：该向导不支持手动积分后的峰）→“积分区域“（在色谱图中拖动，没选中的区域不会峰识别，不会积分）→”基线噪声范围“（一般选取未出峰段作为基线。会扣除极限噪声？）→Cobra平滑密度（默认）→”最小峰面积“（可设，用以剔除杂散乱峰）→通道和进样类型（默认）→点击”完成“。（”检测“下方“分组区“，可修改基线噪声范围的起止时间、积分的起止时间）

②组分表：运行组分表向导→常规（默认）→时间范围（在色谱图中拖动，问题：与Cobra向导中积分范围有何区别？）→筛选（设置色谱峰面积，减少杂峰）→参考光谱（默认）→复核（可修改组分名、保留时间）→点击”完成“（“组分表“下方“分组区“，可修改名称、保留时间，然后，填入各级别浓度，及浓度单位。）

③点击标准谱图上目标物色谱峰，右侧出现标准曲线，点击左上“结果“→”校准“，可查看线性方程各参数。完成样品结果处理。

④剩余模块可默认。

⑤定性：点击“等值图/3D图“，出现下图：将十字中心点移至光斑中心，右侧会出现最大吸收峰及波长，对比标准品及样品，得出定性结论。

3.报告打印：点击左下角“报告设计器“，选择”阳离子模板“，查看”积分“、”校准“

积累与经验总结：

1.2019.05.30工程师上门维护（赛默飞UItiMate3000）：

问题：压力不稳，保留时间飘忽不定。解决：清洗单向阀，用扳手将两个单向阀螺丝拧开（注意，拧上面单向阀螺丝时，需要左右两边一块拧），将单向阀取出，分别置于两个烧杯中，标识出“上”“下”，先用超纯水超声清洗10 min，再用异丙醇超声清洗10 min，完成清洗后安装，测试正常。

问题：进样针进样时有噪音。解决：抹上润滑油后，反复上下运行，正常。

2.2019.06.04工程师上门维护（安捷伦1290）：

问题：仪器泵单元右侧漏液报警。原因：排废管排液不畅，废液回流，导致漏液报警。

附件：

赛默飞液相3000仪器操作步骤(小沂哥).pdf

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