内标标准品标曲和样品加入量的疑问

应助达人

内标法测定时，要保证上机测试曲线溶液中的浓度和上机测试样品溶液中的浓度要一样。内标是用来消除进样歧视的，起到校正的作用，所以要保持曲线和样品里面的浓度一致，比如都是上机进样5ul，那你要保证这5ul进样量里面曲线进入仪器的内标量和样品里面的理论内标量保持一致。

“内标法测定时，要保证上机测试曲线溶液中的浓度和上机测试样品溶液中的浓度要一样。”这句话不太懂，因为我们是预处理前就加入内标物质，这好像并不能保证样品浓度和曲线浓度一致。

应助达人

内标加入量要看化合物的响应，只要响应没问题。稳定性可以，回收率有保障的内标浓度都可以；内标添加跟稀释倍数、定容体积、内标稳定线相关，一般的计算方是先根据内标稳定线确定添加浓度，添加量=添加浓度*定容体积*稀释倍数，注意单位换算

应助达人

内标加入量不一定按方法要求，满足自己仪器响应就可以，一般要求内标在该上机浓度响应值稳定，我们一般选择标曲中间浓度点浓度。内标法要求标曲内标浓度与样品定容后上机浓度一致，比如标曲浓度点为1 2 5 10 25 ppb，内标浓度可以统一加5 ppb，同时保证样品上机浓度也是5 ppb，和样品量关系不大

“标法要求标曲内标浓度与样品定容后上机浓度一致” 我们是前处理之前就加入内标，所以好像并不能保证内标上机的浓度。但是老师的意思我大概懂了，如果我们是预处理之前加入的话，假设做标曲时我们都是加的100ppb的浓度，由于我们最后是浓缩至1ml，中间提取的各过程都不用管（也就是我疑问的定容到200/500都没关系），只需要保证我在预处理前加入的量，浓缩至1 ml后理论浓度是100ppb就可以。

应助达人

对的，所以处理前加入内标可以同时校正回收率和基质效应

内标是最后定容时才加，要保证和标曲一致

现在很多文献都是处理前就加

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