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液相色谱问题

  • Insm_b759f1a
    2023/04/21
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 今天测试一个神经酰胺9的样品,用的液相,流动相都是一样的,发现用PDA测出来的纯度只有50多,用ELSD测出来的纯度却有90多,想不明白为啥?不应该ELSD的纯度更低吗?请各位大神指点一下,非常感谢
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/04/24

    应助达人

    首先楼主确认一下方法是否合适?选择的波长是否合适?随后楼主再重新配制样品复测一下,确认一下,确保仪器走样是OK的,仪器没有问题。PDA检测器可以检测有紫外吸收的物质,而ELSD蒸发光散射检测器可以检测没有紫外吸收的物质,灵敏度也比PDA低。如果复测过后还是同样的情况,我猜测楼主做PDA时应该有很多impurities,这些杂质都有一定的紫外吸收,所以主成分的purity就很低。而用ELSD测时,灵敏度低,很多杂质都扫不出来,因而导致主成分峰面积百分比占比高,最终纯度就高。这些也都只是我的猜测,楼主还需要反复测试,进一步对比确认。

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  • 安平

    第2楼2023/04/24

    应助达人

    楼主详细说明具体的操作条件和定量方法为好。


    elsd的响应是非线性的,需要注意一下。


    是否进样浓度超出某检测器检测范围,是否定量方法不良,均需要考虑

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  • Insm_b759f1a

    第3楼2023/04/24

    就是用的面积归一法,前处理方式都是直接用甲醇溶的样品,然后上机测试,分别在PDA和ELSD测试,同样的进样量,然后纯度就相差很大

    安平(byron1111) 发表:楼主详细说明具体的操作条件和定量方法为好。elsd的响应是非线性的,需要注意一下。是否进样浓度超出某检测器检测范围,是否定量方法不良,均需要考虑

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