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新手小白使用液相的心得体会

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2023/08/01
安阳疾控理检队

液相色谱（LC）

新手小白使用液相的心得体会

在读研期间由于研究手性化合物，我开始经常接触安捷伦1260s系列的液相色谱仪，该色谱仪装配有各式各样的液相色谱谱柱（Chiralpak AD-H column, Chiralcel OJ-H column or Chiralcel OD-H column）。在使用过程中有一些注意事项，可以提高我们的工作效率。首先为了仪器的正常合理运转及其保养，应该将仪器放置在平稳固定的台面上，要求台面无振动，周围无辐射和磁场要保持干净无灰尘，仪器工作的温度大致范围要求是在25-40℃,因为流动相大多数是有机溶剂，我们还要保持室内有一些通风换气的设施设备。之后检查使用的流动相以及色谱柱是否准确无误，流动相我们一般选用正己烷和异丙醇，保持流动相的比例（正己烷：异丙醇=90：10）冲洗仪器，同时保证仪器使用时里面没有气泡才能进行后续的检测使用。由于检测时的样品多为复杂的混合物，色谱柱的材质又比较特殊，空隙较小，所以样品进样前要用有机溶剂溶解，之后用有机滤膜过滤，用来保证检测物质能顺利通过的同时也不堵塞色谱柱。检测时也要保持稳定压强，平衡好基线方便后续的数据处理。实验完成后，要把色谱柱冲洗干净，进样器也要进行大约十遍的冲洗，以便于下次使用时不会影响样品数据的准确度。

在使用过程中我们也经常会出现一些问题，第一是因为打液相时压力一直上不去，后来发现流动相从手性柱里面流出来了，随即我们就关闭了机器重装手性柱，装的时候要要把两边的旋塞弄紧，导管要对准手性柱的孔；第二是打出来液相发现峰太大或者太小，我们一般控制峰高在200－1000之间，所以用量一般进5微升；第三是打液相发现峰连在一起这时候就要调整流动相比例，或者换手性柱。在解决问题的过程中我们对仪器的结构以及化合物的性质有了更多的了解，通过总结使用的经验技巧，也大大提升了我们的工作效率。

一年前，通过疾控中心的考试招聘我有幸进入了理化检验科，对我而言是新实验的开始。科室的一些研究所涉及的仪器与我之前的工作有些相似之处，同时老师们对仪器的使用有着更深层次的见解，也向我们传授了许多经验技巧，实验操作的细节，使我在工作中受益良多。我相信，在以后的工作和实践过程中，我能对液相色谱仪的使用能有更加深入和全面的了解，进一步提升自己的能力！

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