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色谱峰分离度问题

  • Ins_947866fd
    2023/10/04
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位色谱大佬好,我最近在做谷维素的分析。色谱条件:

    NH2氨基柱,流动相:无水乙醇;

    流速:0.8mL/min;

    柱温:40℃;

    检测器:紫外检测器,波长326nm;

    进样量:10μL

    测出来的样品(样品主要组成为脂肪酸、脂肪酸甲酯、甘油酯、谷维素、少量蜡、磷脂等)色谱图分离效果不好,谷维素标品色谱图可以。?
    想请问一下,这是柱子柱效不好了吗(这根氨基柱放了好长时间了),如果是流动相的问题,该如何调节流动相呢?

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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/10/07

    应助达人

    1、基线未归0,从-400左右开始出峰,图谱很难看。
    2、谷维素标准品出峰不是还有很好,由于峰高比较高,纵坐标比例压缩,如果放大看谷维素色谱峰的峰谷,拖尾会更加明显。而且即使不放大,原图从积分红线就能看出,峰拖到18min那里去了。
    3、样品出峰图,分离度很差,有些可以看出包在里面并没有分开,不好定性定量。
    以上表现说明你柱子的柱效肯定不怎么好,建议更换色谱柱,然后再去想办法提高分离度,先把柱子选好,然后再进行优化。

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  • hujiangtao

    第2楼2023/10/07

    应助达人

    应该是柱效降低了

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  • myoldid

    第3楼2023/10/08

    应助达人

    先咨询一下厂家,你这氨基柱是正相还是HILIC,能不能进水?如果能进水的话,可以在流动相中加入10%的水,然后用流动相稀释标品和样品,同时降低标品的浓度。这柱子看起来还有希望的

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  • Insm_993bed98

    第4楼2023/11/20

    检查理论塔板数,拖尾因子,与过往数据做对比,如果变差很多就是色谱柱处问题了。一般来说,但凡峰型有问题的时候,基本上是色谱柱出了问题

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