仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
1
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
认证认可专区
>
能力验证
>
帖子详情
控制菌检验方法验证
状元秀
2024/06/04
私聊
能力验证
控制菌检验方法验证
建立药品的微生物限度检查时,进行控制菌检查方法的验证,以确认所采用的方法适合于该药品的的控制菌检查方法测定。若药品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时,检验方法应进行重新验证。验证试验也可与供试品的控制菌检查同时进行。
1.1.验证用菌株
大肠埃希菌
(Esherichia coli)【CMCC(B) 44102】或同等有效的金黄色葡萄球菌( Staphylococcus)【CMCC(B)26003】或同等有效的乙型付
伤寒沙门菌
(Salmonella paratyphi B)【CMCC(B) 50094】或同等有效的
铜绿假单胞菌
(Pseudomonas aeruginosa)【CMCC (B) 10104】或同等有效的验证实验所用的菌株传代次数不得超过5代(从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为0 代),并采用适宜的菌种保藏技术,以保证试验菌株的生物学特性。
1.2.菌液制备
大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型付伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至10mL营养肉汤培养基中,35~37℃培养18~24小时;
分别取培养液1mL加0.9%无菌氯化钠溶液,采用10倍递增稀释法,稀释至10
-5
~10
-7
,制成每1ml含菌数10~100CFU的菌悬液。
1.3. 阴性菌对照组
设立阴性菌对照组是为了验证该控制菌检查方法的专属性。方法同试验组,验证大肠埃希菌、大肠菌群、沙门菌检查法时的阴性对照菌采用金黄色葡萄球菌;验证铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、梭菌检查法时的阴性对照菌采用大肠埃希菌。阴性对照菌不得检出。
1.4.试验组
常规法
【
大肠埃希菌
】取相当于1g或1mL供试品的供试液至100mL胆盐乳糖培养基中,阳性菌对照加入大肠埃希菌10~100CFU,阴性菌对照加入金黄色葡萄球菌 10~100CFU,35~37℃培养18~24小时,取此培养物按《微生物限度检查SOP》大肠埃希菌项下规定检查。
【
大肠菌群
】取含适量(不少于10ml)的胆盐乳糖发酵培养基管3支,分别加入含供试品1g或1mL 、0.1g或0.1mL、含供试品0.001g或0.001mL的供试液,阳性菌对照加入大肠埃希菌10~100CFU,阴性菌对照加入金黄色葡萄球菌 10~100CFU,35~37℃培养18~24小时,按《微生物限度检查SOP》大肠菌群项下规定检查。
【沙门菌】 取供试品10g或10mL,直接或处理后接种至适量(不少于200mL)的营养肉汤培养基中,用匀浆仪或其他适宜方法混匀,阳性菌对照加入沙门菌 10~100CFU,阴性菌对照加入金黄色葡萄球菌10~100CFU,35~37℃培养18~24小时。按《微生物限度检查SOP》沙门菌项下规定检查。
【
铜绿假单胞菌
】取相当于1g或1mL供试品的供试液至100mL胆盐乳糖培养基中,阳性菌对照加入铜绿假单胞菌10~100CFU,阴性菌对照加入大肠埃希菌10~100CFU,35~37℃培养18~24小时。按《微生物限度检查SOP》沙门菌项下规定检查。
【
金黄色葡萄球菌
】取相当于1g或1mL供试品的供试液至100mL胆盐乳糖培养基中,阳性菌对照加入金黄色葡萄球菌10~100CFU,阴性菌对照加入大肠埃希菌 10~100CFU,35~37℃培养18~24小时。按《微生物限度检查SOP》金黄色葡萄球菌项下规定检查。
培养基稀释法
供试品有抑菌作用,放大培养基量,由1:100放大到1:300、1:500或1:1000,由于容器体积限制,一般放大到500mL或1000mL,本法适用于抑菌作用不强的样品。
薄膜过滤法
采用薄膜过滤法时,取规定量供试液,过滤,冲洗,试验菌应加在最后一次冲洗液中,过滤后,注入培养基或取出滤膜接入增菌培养基
中。
离心沉淀集菌法
取规定量供试液,如供试液含许多药渣,先以500转/分钟离心3~5分钟,取全部上清液,再以3000转/分离心20分钟,取下面1mL液体,并将适量的稀释剂洗涤管底的洗涤液一并移入同瓶增菌液中,培养,本法适用于中度抑菌作用的样品。
中和法
在供试品溶液中加入相应的中和剂,以减除供试品中抑菌成分的作用,中和剂应对微生物无毒性,与抑菌成分结合后的产物应对微生物亦无毒性,或有毒性但不影响待检菌的检出。
1.5.结果判断
至少应进行3次独立平行试验。阴性菌对照组不得检出阴性对照菌。若试验组检出试验菌,照该供试液制备方法和控制菌检查法进行该供试品控制菌的检查;若试验组未检出试验菌,应采用自然沉降法、培养基稀释法、离心沉淀集菌法、薄膜过滤法、中和法等方法或联合使用这些方法消除供试品的抑菌活性,并重新进行方法验证。
文章来源:
网络/LabPTP能力验证平台
编辑:
食品PTP
审核:
PTP小赵
封面图片来源:
创可贴会员,能力验证小编整理。
提醒:
文章、视频、图片等所有内容,仅用于学习交流,若有侵权内容及其他涉法内容,请及时联系删除或修改。 特此声明!
相关话题
1
简易的扩项没有找到相应的能力验证或实验室间比对计划,实验室应该如何处理?
2
对于扩项的项目如果没有相应的能力验证或实验室间比对计划能通过人员对比、设备对比等方式进行验证吗?
3
内部质量控制的话实验室还需要出对外的那种检测报告吗?
4
关于发布CNAS-CL03:2024《能力验证提供者认可准则》的通知
5
关于发布新版《能力验证提供者认可申请书》和《能力验证提供者评审报告》等认可文件暨旧版相关认可文件转换的通知
+关注
私聊
检测一家亲
第1楼
2024/07/05
应助达人
这些都是基本的方法。
0
发表回复
近期热榜
迎国庆送壕礼!十月发帖抢大疆云台
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
喜迎国庆!第十七届原创大赛超级原创日参赛奖励翻倍
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
热门活动
【售后专场--招聘会】
第三届微课大赛投票进行中ing
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
食用油酸价、过氧化值能力验证
求助
2017/03/02
【讨论】参加农药残留验证试验
2007/07/12
能力验证在能力活动中的作用是什么?
求助
2023/07/31
有无同行使用气泡隔断式连续流动分析仪的呢?
求助
2012/07/27
能力验证的结果能快些吗?
讨论
2012/07/11
2017年能力验证计划CNAS PT0031 -1715 日用消费品 塑料中邻苯二甲酸酯的测定
分享
2017/02/05
国家认监委发布关于征集2013年实验室能力验证项目的通知
分享
2012/09/27
金属棒材室温拉伸(国际比对)能力验证的结果处理
求助
2014/11/29
能力验证的形式
第十七届原创
2024/10/02
外部质量控制的影响因素
第十七届原创
2024/10/01
硼的姜黄素方法的校准曲线有借鉴一下的吗,第一次做
求助
2024/09/21
实验室因内部条件变化而不得不偏离计划时,应如何调整?
第十七届原创
2024/09/18
能力验证结果的整改
第十七届原创
2024/09/18
【金秋计划】CNAS评审员如何保持资格和晋级
分享
2024/09/13
【金秋计划】实验室方法验证的信息化管理
分享
2024/09/12
【金秋计划】质量控制的方式、样品和频次
分享
2024/09/08
实验室容量瓶、移液管等玻璃器皿检定
求助
2024/09/25
标准溶液该如何配置?
第十七届原创
2024/09/25
微量注射器用移液器检定规程出具证书,带CNAS logo,合理吗?
求助
2024/09/25
关于气相基线高一倍求助
求助
2024/09/24
浅谈培养基的技术性验收
第十七届原创
2024/09/25
如果计量器具较小,校准标签贴不开怎么办?
求助
2024/09/26
【求助】申请CNAS实验室认可,文审阶段老师提出我司的组织机构图中未体现有关部门对实验室的支撑关系。请问如何修改?
求助
2024/09/24
气象色谱仪显示ALS 故障代码 153是什么情况
求助
2024/09/27
肉类综合检测仪检测什么
分享
2024/06/04
日本,欧洲,美国药典比色液
原创
2024/06/04
水质pH测定平行样判定
已应助
2024/06/04
农夫果园100%番茄汁
原创
2024/06/04
分享核桃乳
原创
2024/06/04
压力泵的压力值一直显示为0,但是可以正常使用,这是什么原因?
求助
2024/06/04
可程式恒温恒湿试验箱在新能源行业起到哪些作用?
分享
2024/06/04
区别:快速温变试验箱与冷热冲击试验箱的异同点
分享
2024/06/04
品牌合作伙伴
丹纳赫苏州基地 打工人的梦想
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...