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【我们不一YOUNG】实验室常见的灭菌消毒方法大全（2）

城头变幻大王骑

2024/07/16

实验室建设

二、高温灭菌法

高温灭菌法是利用高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡，是应用最广泛且有效的灭菌方法。主要用于器械、容器、试剂等灭菌。

（一）高压蒸气灭菌法

用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌，对细菌芽胞也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。主要用于能耐高温的物品，如金属器械、玻璃、橡胶、耐高温塑料制品及试剂的灭菌。高压蒸气灭菌器的类型和样式较多，如：①下排气式压力蒸气灭菌器是普遍应用的灭菌设备，压力升至102.9kPa，温度达121～126℃，维持20～30分钟，可达到灭菌目的。②脉动真空压力蒸气灭菌器已成为目前最先进的灭菌设备。灭菌条件要求：蒸气压力205.8kPa，温度达132℃以上并维持10分钟，即可杀死包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切微生物。

湿热灭菌是目前实验室使用最为广泛，灭菌效果最佳的方法。目前湿热灭菌的仪器技术上也非常成熟，安全系数较高。

高压蒸气灭菌的注意事项：

包裹的物品不宜太大，一般应小于30cm×30cm×50cm，大于该尺寸需要酌情延长灭菌时间；

1.高压锅内的包裹不要排得太密，以免妨碍蒸气透入，影响灭菌效果；

2.对塑料制品不宜放置过于拥挤，以免发生形变；

3.压力、温度和时间达到要求时，指示带上和化学指示剂即应出现已灭菌的色泽或状态；

4.锐性器械，如刀、剪不宜用此法灭菌，以免变钝；

5.瓶装液体灭菌时，如有塑料瓶盖要适当旋松瓶盖，并用牛皮纸或纱布包扎瓶口；如有橡皮塞时，应插入针头排气，切记要保持瓶内外的连通，防止高温膨胀爆裂；

6.注明灭菌日期和物品保存时限，一般可保留1～2周；

7.应有专人负责，每次灭菌前，应检查安全阀的性能，以防压力过高发生爆炸，保证安全使用。

（二）干热灭菌法

灭菌条件为：160℃维持2小时；170℃维持1小时；180℃维持30分钟；高温下可达灭菌要求。适用于易被湿热损坏和在干燥条件下使用更方便的物品（如金属、玻璃、陶瓷及凡士林纱布条等）灭菌。由于其对烤箱要严格要求（国内产的烘箱质量都有点悬），且大功率、高温下危险系数较大，一般不建议使用！特殊情况下，如需要灭活器械、容器中对于温度超级稳定的RNase时，才考虑使用（其实也可以DEPC预处理器械、容器、溶剂等，然后湿热灭菌！）。

干热灭菌法的注意事项：

1.对灭菌对象的理化性质有一定了解，明确对象在高温下的稳定性；

2.对设备的情况、参数有清醒认识，了解设备的温度设计上限；

3.专项供电，确保接入电路足够负荷；

4.灭菌过程中，相关人员要实时在岗监管，不得离岗，如遇特发情况及时切断电源！

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