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【我们不一YOUNG】实验室常见的灭菌消毒方法大全(4)
城头变幻大王骑
2024/07/16
私聊
实验室建设
四、紫外线灭菌
紫外线的定义是波长在10纳米到400纳米之间的电磁辐射。不过在实际应用中,使用的波长一般在100纳米以上。波长在315到409纳米之间的UVA通常可以把皮肤晒黑,波长280到315纳米的UVB可以灼伤皮肤并增加皮肤癌风险,波长在200到280纳米的UVC可以有效地杀灭细菌和病毒,而波长在100到200纳米之间的紫外线会被空气中的氧气吸收,所以只能在真空中或者至少是完全无氧的环境里工作,也就不适合用于现实杀菌了。传统的紫外杀菌选用254纳米的波长。
当紫外线被细菌或者病毒吸收之后,就会破坏DNA,从而使它们失去增殖能力。就杀菌结果而言,跟加热或者用化学物质处理是一样的。
紫外杀菌的能力除了跟波长有关,还取决于灭菌物被辐射到的能量。在选定的254纳米波长下,杀菌效果跟能量强度呈现一个拉伸过的S型。也就是说,在低能量下,杀菌效果很差,这是因为细菌或者病毒跟人体一样,对于DNA损伤有一定的修复能力。在照射能量低的时候,损伤的DNA被及时修复,细菌和病毒就能够继续增殖下去。当能量高到一定程度,DNA修复系统实在忙不过来了,DNA损伤急剧增加,宏观上表现出来就是细菌或病毒被“杀死”了。超过这个能量强度,每增加一点,灭菌能力都会大大增加。但是增加到一定程度,就进入第二个平台——再继续增高能量,杀菌效果增加得也很少。这个灭菌效果上的“尾巴”可能是源于一部分微生物对于紫外线攻击很顽强,也可能源于有一部分被处理样品无法被照射到。
因为这个“尾巴”的存在,紫外杀菌难以实现加热或者化学杀菌剂那么彻底的杀灭。通常把降低4个对数值作为“灭菌标准”,也就是还有万分之一的细菌活下来。而鲜牛奶的巴氏杀菌——在72摄氏度下处理15秒——则通常是降低5个对数值,即最多只有十万分之一的细菌存活。如果降低的对数值是12个以上,几乎就没有细菌能够幸存了。
不同的微生物对紫外线的敏感性不同,有的在较低能量强度下就会被大量杀灭,而有的则需要更高能量才行。以降低4个对数值为标准,研究中检测过的细菌有的只需要每平方米几十焦耳的能量,有的则需要每平方米300焦耳以上。我们并不知道现实的食物中存在哪些细菌,又各有多少,所以总是把最顽强的那个作为目标,顺便把其他的灭了。因此,紫外杀菌所用的能量强度需要在每平方米400焦耳以上。
各种灭菌技术的灭菌效果都会受到灭菌物理化性质的影响。比如加热或者高压灭菌,温度、酸碱度和压力都会有很大影响。而在紫外灭菌中,这些因素就不那么重要。紫外杀菌的关键是紫外线能够达到细菌,所以穿透性是关键。诸如灭菌物的组成、固体含量、颜色等因素都会影响紫外线的吸收,从而影响它穿透的厚度,也就对杀菌效果有很大的影响。如果灭菌物均一、透明,紫外线的穿透性好,灭菌效果就会好;反之,如果灭菌物浑浊,那么紫外线就会被散射,能量在穿透中降低,灭菌效果就会比较差。
总的来说,紫外线的穿透能力比较差,通常也就能穿透两三厘米的厚度。但如果用在某些物质短时间灭菌,效果还是很好的。
注意事项:
1.
选择紫外灯时,应该仔细核对型号、适用范围和注意事项。不要进入开启紫外消毒灯的室内。千万不要对着消毒灯验钞或者观察荧光,任何时候都不应该直视紫外灯管。紫外灯应该尽可能只在封闭空间内小范围使用,并避免不必要的暴露
2.
在使用过程中,应保持紫外线灯表面的清洁,一般每两周用酒精棉球擦拭一次,发现灯管表面有灰尘、油污时,应随时擦拭。
3.
用紫外线消毒物品表面时,应使照射表面受到紫外线的直接照射,且应达到足够的照射剂量
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