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【我们不一YOUNG】+液相分析中流动相的选择原则

通标小菜鸟

2024/07/24

液相色谱（LC）

1、毒性小的溶剂
在选择溶剂时，我们要尽量选择毒性较小的溶剂。为了确保安全，我们需要了解常用试剂的MSDS（材料安全数据表），特别是了解它们的毒性以及如何处理突发情况。
2、?溶剂互溶性
在选择溶剂时，我们需要确保所选的溶剂彼此之间具有良好的互溶性。这样可以确保溶剂能够充分混合，提供稳定的流动相。
3、与检测器匹配
根据不同的检测器类型，我们需要选择适合的流动相。例如，在紫外检测器下，流动相的截止波长应低于样品的检测波长；在示差折光检测器下，流动相的折光率与样品的差异应较大；在ELSD（蒸发光散射检测器）下，应选择挥发性或受热分解成气体的流动相；在质谱检测器下，应选择能促进化合物电离的流动相。
4、低粘度
选择具有低粘度的溶剂非常重要。高粘度溶剂会影响传质和扩散，降低柱效，并增加柱压。
5、流动相pH
在反相模式下，对于可电离的化合物，我们应调节流动相pH使待测物不电离，处于分子状态。一般来说，对于酸性分析物，我们可以使用流动相pH比分析物酸度系数更低的流动相；对于碱性分析物，我们可以使用流动相pH比分析物酸度系数更高的流动相。
6、流动相中的缓冲盐
在选择流动相缓冲盐时，我们需要考虑其在有机相中的溶解度。一般来说，运行梯度时不会超过70%有机相，以防止泵头处发生盐析。我们还需要考虑将B相配制成有机相与水混合溶液。
7、尽量避免使用离子对试剂如果必须使用离子对试剂，我们应尽量专柱专用，做好标记，因为离子对会改变色谱柱填料的性质。
8、流动相的纯度
在HPLC中，我们应使用色谱纯的有机相，而在水相中，我们应使用二次纯水或屈臣氏蒸馏水。在质谱分析中，我们需要使用质谱纯的有机相和水。
9、避免对色谱系统造成损坏
选择溶剂时，我们需要注意避免对色谱系统造成损坏。例如，二氯甲烷会腐蚀泵的金属组件，尽量与其他试剂预混后使用，并及时更换冲洗系统。碱性流动相会对普通色谱柱的硅胶造成溶解塌陷，而有机硅化的色谱柱对碱性环境的稳定性更好一些。
10、保护样品不受破坏
在选择流动相时，我们需要确保流动相不会对样品造成破坏。还有对于溶解性差的样品，如果选择不当，可能导致样品析出，从而影响分离，并可能堵塞进样器或色谱柱。
11、制备后处理方便选择具有良好挥发性和低沸点的溶剂，有利于制备色谱分离后的馏分处理。

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